细胞培养瓶(细胞培养的注意事项是什么?)
1.细胞培养的注意事项是什么?
原代动物细胞培养：
1、实验材料要新鲜，从活体分离材料后要低温保存，并尽快进行细胞分离实验。
2、无菌操作。操作时用的培养液，可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。
3、用酶法分离细胞时，注意酶液的浓度和控制消化时间。
贴块法分离细胞时，注意动作要轻柔，不要伤到细胞组织，组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。
4、培养液的选择。不同的细胞有对培养液中营养的要求不同，根据所分离细胞的特性选择。
传代细胞培养：
1、无菌操作
2、控制消化时间
3、及时关注细胞生长状态
2.细胞培养过程应该注意什么问题补充:可是很难保证完全无菌,很容易
细胞培养过程中的注意事项 ⑴温度 温度过低时细胞生长缓慢甚至不生长。
利用冷冻保藏细胞可保持细胞的原有分裂分化能力。温度过高导致细胞死亡。
这主要是由酶和蛋白质所需要的最适温度决定的。多数生物大分子遇到高温后容易导致空间结构改变或者丧失（变性）。
细胞膜遇到高温后容易变态。在自然界，既有耐高温的恒温培养箱细胞，也有耐低温的细胞。
在极端情况下生长的生物对付极端环境的机制研究在生物进化和农业、环保、发酵工业中意义重大。 ⑵pH 过酸或过碱可导致细胞死亡。
这主要与蛋白质的变性和细胞膜的结构受损有关。 ⑶渗透压 细胞内外可溶于水的物质比例和种类决定细胞的膨胀与收缩程度，因为细胞膜是半透膜，只允许对自己有利的物质通过。
同一物质在细胞内外的分布的数量不同，当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时，有可能导致细胞干瘪死亡，这些物质在细胞内过多时导致细胞过量吸水膨胀。 细胞膜调节渗透压的能力是有限的。
⑷营养物 营养物和水一起，又叫细胞培养液，培养液中含有细胞增殖和生长所需要的各种物质。营养物包括：N 源、C源，这些物质与提供能量有关；无机盐、维生素、激素，这些物质与代谢调节控制有关。
细胞培养液的设计一直是细胞离体培养技术的关键。理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物、调节物质的全部需要。
在干细胞分化研究与应用中，关键是找到一种使干细胞分化成为所需细胞和组织的营养液。相同的人干细胞，放在不同的营养液中分化培养出人的各种脏器，这个昔日的梦想已经开始成为现实。
植物细胞的组织培养技术已经基本完善配套。名贵花卉、中草药、脱毒马铃薯、组织培养莲菜苗等植物细胞与组织培养技术的不断完善，特别是由于组织培养液的商品化已经被广大农民普遍接受。
⑸水 水是细胞需要数量最大的物质，不同的物种、不同部位、不同生长期的细胞含水量差别相当大。 干旱植物细胞的含水量高达90%。
水的需求量一般随同细胞培养液一起考虑。 ⑹无菌条件 体外细胞培养仅仅是对所需的细胞进行培养，但环境中（如空气）有各种其他微生物，必须对所需细胞进行无杂菌的隔离培养。
无菌条件是细胞离体培养最基本的条件。 ⑺光 植物细胞和少数细菌需要利用光进行光合作用。
⑻气体 动物细胞需要不断供给氧气和排除二氧化碳，植物细胞与此相反。 二氧化碳的作用：调节pH，有缓冲作用，没有刺激动物细胞呼吸的功能对不起，我记得也不是很清楚。
我只记得培养皿要消毒，然后培养过程中要加入抗生素（抑制细菌生长），希望能帮到你···。
3.细胞培养过程应该注意什么问题
细胞培养过程中的注意事项
⑴温度
温度过低时细胞生长缓慢甚至不生长。利用冷冻保藏细胞可保持细胞的原有分裂分化能力。温度过高导致细胞死亡。这主要是由酶和蛋白质所需要的最适温度决定的。多数生物大分子遇到高温后容易导致空间结构改变或者丧失（变性）。细胞膜遇到高温后容易变态。在自然界，既有耐高温的恒温培养箱细胞，也有耐低温的细胞。在极端情况下生长的生物对付极端环境的机制研究在生物进化和农业、环保、发酵工业中意义重大。
⑵pH
过酸或过碱可导致细胞死亡。这主要与蛋白质的变性和细胞膜的结构受损有关。
⑶渗透压
细胞内外可溶于水的物质比例和种类决定细胞的膨胀与收缩程度，因为细胞膜是半透膜，只允许对自己有利的物质通过。同一物质在细胞内外的分布的数量不同，当某一种极溶于水的物质在细胞外浓度过大时，有可能导致细胞干瘪死亡，这些物质在细胞内过多时导致细胞过量吸水膨胀。细胞膜调节渗透压的能力是有限的。
⑷营养物
营养物和水一起，又叫细胞培养液，培养液中含有细胞增殖和生长所需要的各种物质。营养物包括：N 源、C源，这些物质与提供能量有关；无机盐、维生素、激素，这些物质与代谢调节控制有关。细胞培养液的设计一直是细胞离体培养技术的关键。理想的细胞培养液可以同时解决细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物、调节物质的全部需要。在干细胞分化研究与应用中，关键是找到一种使干细胞分化成为所需细胞和组织的营养液。相同的人干细胞，放在不同的营养液中分化培养出人的各种脏器，这个昔日的梦想已经开始成为现实。植物细胞的组织培养技术已经基本完善配套。名贵花卉、中草药、脱毒马铃薯、组织培养莲菜苗等植物细胞与组织培养技术的不断完善，特别是由于组织培养液的商品化已经被广大农民普遍接受。
⑸水
水是细胞需要数量最大的物质，不同的物种、不同部位、不同生长期的细胞含水量差别相当大。干旱植物细胞的含水量高达90%。水的需求量一般随同细胞培养液一起考虑。
⑹无菌条件
体外细胞培养仅仅是对所需的细胞进行培养，但环境中（如空气）有各种其他微生物，必须对所需细胞进行无杂菌的隔离培养。无菌条件是细胞离体培养最基本的条件。
⑺光
植物细胞和少数细菌需要利用光进行光合作用。
⑻气体
动物细胞需要不断供给氧气和排除二氧化碳，植物细胞与此相反。
二氧化碳的作用：调节pH，有缓冲作用，没有刺激动物细胞呼吸的功能
4.细胞培养时要注意哪些事项
即从短期、中期和长期三个阶段来规划本单位的科研目标，明确各个阶段可以采用的科研工具、相关的资源需求、人员配置等要素；
相关的资源收集和管理
根据整体规划中不同阶段的资源需求，进行相关资源的收集和管理；与HIS、LIS等系统接口，信息更加集中，更加易于分析；
保存箱空间利用率
样本积累到一定数量后，手工方式查找和存放样本非常困难而且容易出错，存放样本的容器（例如冰箱、液氮罐）利用效率也会逐渐降低。因为一开始样本可能是分类顺序存放的，但是根据科研需求的不同，取样会从容器的不同位置取走样本，一段时间后，容器中会产生大量的零散空位却无法有效利用。这就需要利用信息化系统来进行样本存放位置的自动分配和查找，提高冰箱等容器的空间利用效率。
5.细胞培养应注意的无菌操作主要有哪些
1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。
2.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待30min以上，以排尽臭氧。 3.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。
4.风淋2分钟。 5.0.1%过氧乙酸水泡手，擦干。
6.点燃酒精灯；超净台内应避免放入过多的物品；使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。 7.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘；打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。
8.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。 9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。
10.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。 11.操作完毕后恢复工作台面。
