组织常用固定方法(组织和细胞的固定的方法)
1.组织和细胞的固定的方法有哪些
组织和细胞的固定的方法，浸润法
浸润法是组织化学和免疫
组织化学常用的固定方法，一次要处理许多组织样品时也多用此法。
预先需估计固定剂的用量，并在取材前配好固定液，分装于小容器内，在容器上标记组别和取材时间。容器内放人记录组织类型的纸条，以便包埋时辨认。固定液的用量应是样品的40倍，以保证组织充分固定。固定时间可根据所选固定液和组织类型而定。
若进行酶组织化学染色，应在4℃短时间固定，固定时间长会导致酶活性减弱，甚至消失。
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2.组织和细胞的固定用什么方法
灌流固定法
此法是经血管途径，将固定液灌注到欲固定的器官内，使生活的细胞在原位及时迅速固定，取下组织之后再浸入相同的固定液内继续固定。
灌流固定时大动物多采用输液方式，将固定液从一侧颈总动脉或股动脉输入，从另一侧切开静脉放血，输入固定液与放血同时进行。固定液的输人量因个体不同而异，即500―2000ml不等。
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3.最常用到的几种组织固定液
(1)中性缓冲甲醛。
该液能够固定大多数组织结构，对脂类有较好的固定效果。免疫组化、原位杂交等试验都可以使用。
本液还可以长时间存放，是实验室常备的固定液之一。固定液浸透较慢，固定时间不限，浸透之后可以长时间存放（免疫组化和原位杂交标本建议不要这么做）。
美中不足是染色时酸性染料着色不佳，并且本液对糖类没有固定作用。 （2）AAF。
该液由醋酸（A）、酒精（A）和甲醛（F）为主要成分，广泛用于动植物组织的固定和各种实验检测，植物固定则是首选。固定液渗透均一，速度很快。
固定时间一般为4 ~ 24 h。此液处理后，染色结果细腻，但酸性染料着色力下降。
本液配制后可以短时间放置。 （3）Bouin。
过去常用的一种固定液，主要用于软化皮肤或者富含结缔组织的标本，在胚胎标本处理中使用很广。用本液处理后，酸性染料着色鲜艳。
但是，由于含有苦味酸，不能用于原位杂交等实验检测。此外，本液对很多细胞器的破坏较大，尤其不适于固定肾脏标本。
经本液固定的标本，尺寸应尽可能小，否则内外固定的效果有所差别。本液可以较长时间存放，但标本在其中不应久存，固定8 ~ 24 h为宜。
（4）Zamboni。用于免疫组化和免疫电镜的首选固定液。
保存细微结构和抗原特性最好的固定液之一。固定液浸透速度较慢，要求标本不能过大，常用于血管灌注。
该液可以长时间存放，标本在其中也可以保存较长时间，抗原封闭作用相对较弱。由于含有苦味酸，故不用于原位杂交试验。
（5）Helly,Susa,Zenker。这是三种比较相近的固定液，含有汞盐和重铬酸钾。
经这类固定液处理，标本对酸性和碱性染料均有较好的亲和能力。染色处理前需要脱汞和脱碘操作。
目前除了几种传统染色更鲜艳外，并无其他优势。
4.固定有哪些方法
(1) 外固定：常用方法有小夹板固定或石膏绷带固定。
①小夹板 固定：主要适用于四肢长骨的较稳定骨折，固定范围不包括骨折处的上 下关节，利于早期功能锻炼。但偶有固定不牢的可能，易使骨折移位、不愈合、畸形愈合，若捆扎过紧影响肢体血运、发生远端缺血。
②石膏 绷带固定：可按肢体形状塑形，干固后固定可靠，固定范围大，不易发生 再移位，但不利于功能锻炼。 （2） 持续牵引固定：皮牵引和骨牵引。
骨牵引较直接且力量大，利 于开放性伤口观察及换药，利于功能锻炼，但不能早期下床活动；皮牵 引较间接且力量小，多应用于儿童及股骨近端骨折的患者。 （3） 内固定：复位准确且固定牢靠但具有创伤。
内固定器材有多 种，常用的有金属丝、接骨板、螺丝钉、髓内钉、加压钢板等。
5.几种细胞固定方法
选择最佳固定液标准是：
(1)最好地保持细胞和组织的形态结构；
(2)最大限度地保存抗原的免疫活性。一些含重金属的固定液在免疫组化和细胞化学技术中是禁用的；
(3)不要用可能带有自发荧光的固定剂，如带有苦味酸的固定剂，还有甲醛升汞固定液，会使上皮细胞产生非特异性荧光；
(4)固定剂的选择、固定时间、温度和PH值都会影响实验结果。
单纯固定液（1）4%中性甲醛固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作（Job）。中性甲醛是以PH7.2-7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。
甲醛（40%） 100ml
无水磷酸氢二钠 6.5g
磷酸二氢钠 4.0g
蒸馏水 900ml
(2)乙醇固定液：使用时以80%-95%的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，假如用于证实尿酸结晶和保存糖原，可用于100%乙醇固定组织。
(3)4%多聚甲醛固定液：主要用于培养细胞的固定。
混合固定液（1）乙醇-甲醛（乙醇-福尔马林，AF）固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
甲醛（40%） 100ml
95%乙醇 900ml
(2)B5（醋酸钠-升汞-甲醛）固定液：多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠 1.25g升汞 6.0g蒸馏水 90ml
使用前加入甲醛 10ml
(3)Bouin固定液：非凡适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
饱和苦味酸水溶液（约1.22%） 75ml甲醛 25ml冰醋酸 5ml(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，非凡适用于固定外膜致密的组织，也适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇 60ml氯仿 30ml冰醋酸 10ml
(5) Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清楚，但成本较高且需非凡处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效。
升汞 5.0g
重铬酸钾 2.5g
蒸馏水（加至） 100ml
6.组织施工的方式有哪些
答：考虑工程项目的施工特点、工艺流程、资源利用、平面或空间布置等要求，其施工可以采用依次、平行、流水等组织方式。
（1）依次施工方式具有以下特点： 1）没有充分地利用工作面进行施工，工期长； 2）如果按专业成立工作队，则各专业队不能连续作业，有时间间歇，劳动力及施工机具等资源无法均衡使用； 3）如果由一个工作队完成全部施工任务，则不能实现专业化施工，不利于提高劳动生产率和工程质量； 4）单位时间内投入的劳动力、施工机具、材料等资源量较少，有利于资源供应的组织； 5）施工现场的组织、管理比较简单。 （2）平行施工方式具有以下特点： 1）充分地利用工作面进行施工，工期短； 2）如果每一个施工对象均按专业成立工作队，则各专业队不能连续作业，劳动力及施工机具等资源无法均衡使用； 3）如果由一个工作队完成一个施工对象的全部施工任务，则不能实现专业化施工，不利于提高劳动生产率和工程质量； 4）单位时间内投入的劳动力、施工机具、材料等资源量成倍地增加，不利于资源供应的组织； 5）施工现场的组织、管理比较复杂。
（3）流水施工方式具有以下特点： 1）尽可能地利用工作面进行施工，工期比较短； 2）各工作队实现了专业化施工，有利于提高技术水平和劳动生产率，也有利于提高工程质量； 3）专业工作队能够连续施工，同时使相邻专业队的开工时间能够最大限度地搭接； 4）单位时间内投入的劳动力、施工机具、材料等资源量较为均衡，有利于资源供应的组织；。
7.组织部门划分的常见方法有那些,并对每种方法进行说明
部门划分，亦称为部门化，是对完成组织目标所必须开展的各项活动，按照一定的方式加以归并组合，以形成便于管理的单位或部门。
部门划分的基本方法有如下几种： （1）按职能划分部门 这是应用最广泛的一种部门划分方法，几乎可以在所有类型组织的结构中找到它的踪迹。任何一个企事业组织存在的目的都是要创造某种为他人所需要的物品或劳务，所以，诸如制造（创造或增加物品或劳务的效用）、销售（寻找愿意按一定价格购买物品或接受服务的顾客）、财务（资金的筹措、保管和运作）等，可以说是所有的企事业组织的基本职能。
以这些基本职能为依据，便可以将组织划分为生产部门、销售部门、财务部门等。当然，由于各种组织的活动领域以及同一职能在不同组织中的重要程度不同等原因，现实中这些职能部门在不同类型的组织中会有不同的具体名称。
按照职能划分部门的好处是：第一，有利于确保组织的主要基本活动得到重视；第二，由于遵循了专业化原则，有利于提高人员使用的效率，同时也简化了培训工作；第三，由于最高主管要对最终成果负责，从而为高层实施严格控制提供了手段。 这种划分部门方式的缺点在于，它容易使人们过度局限于自己所在的职能部门而忽视组织整体目标，部门间的协调比较困难；只有最高主管才能对最终成果负责，因而对各部门的绩效和责任很难进行评价，也不利于培养综合全面的管理人才。
（2）按产品划分部门 这是许多开展多角化经营的大企业经常采用的部门划分方式。它实际上是从按照职能划分部门的企业中逐步发展起来的。
因为随着企业规模的扩大和产品品种的增加，管理工作变得越来越复杂，各部门主管者的工作负担也越来越重，而管理幅度的客观限制又使得他们难以通过增加直接下属的办法来解决问题，因而，此时按照产品或产品系列来重新组织企业活动就成为必要。在这样的结构安排下，组织将有关某产品或产品系列的生产、销售、服务等职能活动方面授予该产品分部的经理，使他们对该产品经营的利润负起责任。
按照产品划分部门的好处是：有利于企业采用专门设备，促进协调，充分发挥人员的技能和专门知识，也有利于产品和服务的改进和发展；能够明确利润责任，便于最高主管把握各种产品或产品系列对总利润的贡献；有利于锻炼和培养独当一面的总经理型的人才。 这种划分部门方式的缺点主要是：它对产品分部主管人员的全面管理能力要求高；各产品分部的独立性较强而整体观念较弱；各产品分部内都需要保持职能部门或职能人员，从而造成资源重复配置、管理费用增加。
（3）按地域、区域划分部门 这是经营活动在地域上比较分散的企业所常用的一种部门划分方法。其做法是，将某一地区的业务活动集中起来，并委派相应的管理者，形成区域性的部门。
按照地域划分部门，有利于鼓励地方参与决策，促进地区活动的协调；有利于管理者注意当地市场的需要和问题；生产的当地化有利于降低运输费用，缩短交货时间；有利于培养能力全面的管理者。 这种方法的主要缺点是，由于机构重复，使得费用增加，总部对地方控制的难度较大，要求管理者具有全面的管理能力。
（4）按顾客划分部门 有许多组织按照自己所服务的顾客来划分部门。这种方法是将与某一特定顾客有关的各种活动结合起来，并委派相应的管理者以形成部门。
按照顾客划分部门的目的是为了更好的迎合特定顾客群体的要求。采用这种方法有利于重视顾客的需要，增加顾客的满意程度，并有利于形成针对特定顾客的技能和诀窍。
不足之处主要是，按照顾客组织起来的部门常常要求特殊对待而造成部门间协调困难，管理者必须要熟悉特定顾客的情况，否则在有些情况下很难轻而易举地对顾客进行区分。 （5）按照技术或设备划分部门 制造业企业中设立的焊接车间、压力加工车间、电镀车间，医院的放射科、CT室等，就是按照技术或设备组织业务活动的。
这种方法有利于充分发挥设备的能力和专业技术人员的特长，便于设备维修和材料供应。不足之处是容易强调局部利益而忽视整体目标。
（6）按照时间划分 根据时间来组织业务活动是最古老的划分部门的方法之一，多见于组织的底层。在许多组织中，由于经济的、技术的或其他一些原因，正常的工作日不能满足要求，而必须采用轮班的做法。
例如，炼钢炉、医院的集中监护室、消防队等，均采用这种方法来进行组织。采用这种方法有利于连续、不间断地提供服务和进行生产，有利于使设备、设施得到最充分的利用。
缺点在于夜间可能会缺乏监督，人员容易疲劳，协调和沟通有时会比较困难。 （7）按照人数划分 单纯地按照人数来安排业务活动是一种最原始、最简单的划分部门的方法。
当最终成果只是取决于总人数时，或者说每个人的贡献都是单纯无差别的简单劳动时，采用这种方法是有效的。
8.组织措施包括哪些
保证安全的组织措施和技术措施一、保证安全的组织措施一般包括：工作票制度、工作许可制度、工作监护制度、工作间断、转移和终结以及恢复送电制度。
1、工作票制度工作票是准许在电气设备，热力和机械设备以及电力线路上工作的书面命令书。（1）发电厂（变电站）第一种工作票；在发电厂或变电所高压电气设备上工作，需要全部或部分停电；在高压室内的二次接线和照明等回线上的工作，需要将高压设备停电或做安全措施的工作。
（2）发电厂（变电站）第二种工作票；在发电厂或变电所的电气设备上带电作业和在带电设备外壳上的工作，在控制盘和低压配电盘、配电箱、电源干线上的工作；二次接线回路上工作而无需将高压设备停电；转动中的发电机，同期调相机的励磁回路或高压电动机转子电阻回路上的工作；非当班值班人员用绝缘棒和电压互感器定相或用钳型电流表测量高压回路的电流。（3）电力线路第一种工作票；在停电线路（或在双回线路中的一回停电线路）上的工作；在全部或部分停电的配电变压器高架上或配电变压器室内的工作。
（4）电力线路第二种工作票；在电力线路上带电作业；在带电线路杆塔上工作；在运行中的配电变压器台上或配电变压器室内的工作。（5）热力机械工作票；（6）一级动火票；（7）二级动火票。
工作票所涉及人员：（1）工作票签发人；（2）工作负责人（监护人）；（3）工作许可人；（4）工作班成员。2、工作许可制度工作许可制度，是在完成安全措施之后，为进一步加强。
