1.首先在进行溶解前,先对样品进行研磨,研磨的充分程度,可以直接影响到脂肪的提取速度,研磨充分可以使脂肪更好的溶解在石油醚、乙醚等有机溶剂中。
2.当样品被研磨后,将样品装入滤纸筒,此时滤纸筒一定要紧密,而且滤纸筒的高度不能超过回流弯管,否则溶剂不易穿透样品。
3.提取时是用乙醚作为脂肪的溶剂,乙醚的沸点为40℃左右,因此温度不要太过,一般的70-85℃左右即可。
4.实验中使用的试剂必须是无水试剂,例如:如果实验中用到的是乙醚,那么乙醚必须使无水乙醚,因为如果含有其他的物质,如水,就可能将样品中的糖分或者无机物抽出,影响脂肪的测定结果。因此,也要保证实验中用到的溶剂杯以及其他物品都是干燥的。
5. 冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管,这样不仅可以防止空气中水分进入, 而且还可以避免乙醚挥发在空气中,这样可防止实验室微小环境空气的污染。 如无此装置,塞一团干脱脂棉球亦可。一般全自动或者半自动的机器在冷凝管顶部会有盖子,这样也能很好的起到保护实验,避免溶剂挥发的效果。
6.用脂肪抽提仪对脂肪进行充分抽提后,就可以对样品及醚提出物进行烘干或者对溶剂杯进行烘干。烘干时间不宜过长,因为一些不饱和脂肪酸,容易在加热过程中被氧化而影响脂肪测定的最终结果。在没有真空干燥箱的条件下,可以在100-105℃下干燥1.5-3小时。
一般是用正己烷直接用索氏提取器,或直接回流提起,然后浓缩回收溶剂即可得到粗脂肪。
索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成的,提取管两侧分别有虹吸管和连接管。各部分连接处要严密不能漏气。提取时,将待测样品包在脱脂滤纸包内,放入提取管内。提取瓶内加入石油醚,加热提取瓶,石油醚气化,由连接管上升进入冷凝器,凝成液体滴入提取管内,浸提样品中的脂类物质。待提取管内石油醚液面达到一定高度,溶有粗脂肪的石油醚经虹吸管流入提取瓶。流入提取瓶内的石油醚继续被加热气化、上升、冷凝,滴入提取管内,如此循环往复,直到抽提完全为止。
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