反射仪法快速测试田间土壤硝态氮含量的方法如下。
(1)方法原理。在田间条件下,按照土壤样品采集规范完成混合土样的采集、土样混合、过5毫米筛、浸提等步骤,采用反射仪硝酸盐快速定量方法,测得土壤硝酸盐的含量。
(2)仪器设备。取土工具(土钻)、天平(精读0•1克)、称量勺、称量纸、定性滤纸、胶卷盒或小烧杯、量筒、封口袋或振荡瓶、反射仪、硝酸盐试纸(0-90毫克/升N03)。
(3)土样采集。用土钻或土沪采取根层土壤(主要取根系密集层的土壤),将采集的新鲜土壤样品在田间捏碎混匀过5毫米筛备用。
(4)土壤待测液的制备。称取混合好的新鲜土样20.0克,放人封口袋或振荡瓶中,加20.0毫升去离子水,按1:1水土比浸提,人工上下左右晃动5次,每次2分钟,中间静止1分钟。
定性滤纸过滤到小烧杯或胶卷盒中,留滤液备用(也可用滤纸反滤,吸取清夜待测)。另称取一份新鲜土样测定水分含量。
青饲玉米硝酸盐含量的测定(刘贵波提供提取部分)资料来源:韩立英,玉柱,施氮肥对全株玉米青贮饲料硝酸盐含量的影响,中国饲料,37-39.
原理:在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(pH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可直接比色测定。
1 样品处理:样品经组织混匀机打碎混匀,称取10.xxg,于250ml消煮管中,加水100ml,100度沸腾30分钟,冷却,加水定容,混匀,上清液或滤液待用。
2 测定:取待测液和系列标准曲线均0.1ml,于20ml干试管中,加5%水杨酸-硫酸0.4ml,混匀,室温20分钟后加8%氢氧化钠9.5ml, 混匀,冷却后410nm比色。
标准曲线配液表(定容50ml)
NO3-N浓度(ppm)
500ppmNO3-N(ml)
5%水杨酸-硫酸ml
室温反应20分钟
8%氢氧化钠ml
0
0
0.4
9.5
20
2
40
4
80
8
120
12
X
0.1
4 计算 硝态氮含量mg/kg=读数(ppm)*取样体积(0.1ml)*取样倍数(250/0.1)/样品重g
硝酸盐含量(mg/kg)=硝态氮含量mg/kg*62/14
5 试剂:
5.1 5%水杨酸-硫酸:称取水杨酸5.0g,溶于100ml浓硫酸中,4度一周内有效。
5.2 8%氢氧化钠:称取80g氢氧化钠,加水1000ml,混匀。
国标法使用酚二磺酸测定水质中的硝态氮。
原理: NO3-在无水条件下与酚二磺酸试剂作用,生成硝基酚二磺酸。 C6H3OH(HSO3)2+NO3-=C6H2OH(HSO3)2NO2+OH- 2,4-酚二磺酸 6-硝基酚-2,4-二磺酸 生成物在酸性介质中无色,碱化后则为稳定的黄色盐溶液,可在400-425nm处比色测定。
试剂配制: (1)酚二磺酸显色剂:将3g结晶纯酚与20。1ml浓H2SO4(比重1。
84)混合,在沸水浴上加热6小时,加热时瓶口用带长玻管的塞子塞住,以使酸不致于蒸发损失(如有结晶,可以重新加热,不能加水)。 (2)20%NaOH溶液:20gNaOH加水溶解,稀释至100ml。
(3)硝态氮标准溶液:0。7218gKNO3(A•R)溶于水,定容至1L。
此溶液每毫升含硝态氮100μg(100mg/kg)。再将此液稀释10倍,即每毫升含硝态氮10μg(10 mg/kg )。
(4)硝态氮标准曲线绘制:分别取10μg /ml硝态氮标准液2、4、6、8、10、12ml(分别为20、40、60、80、100、120μg)于瓷蒸发皿中,在水浴上蒸干,与待测液相同操作进行显色,比色,绘制标准曲线。 前期蒸发可考虑用电炉加石棉网加热[防止沸腾造成损失],快要蒸干时应放在较低温度下蒸干以防化合物变性损失。
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