实验室中的灭菌方法(实验室常用的灭菌方法)
1.实验室常用的灭菌方法有哪些
主要包括以下三种：干热灭菌；湿热灭菌；紫外灭菌1.干热灭菌法1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要用于接种工具灭菌，在火焰上灼烧即可达灭菌目的，火焰灭菌通常用于无菌操作中试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等实验物品的灭菌，防止管口污染。
1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌.将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后，在烤箱内加热至160℃，保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃.此外降温过速，骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密，应有空隙，利于热空气流动，过密，致使温度不均，部分物品灭菌不彻底.2.湿热灭菌法通过加压提高蒸汽温度，用高压蒸汽灭菌，温度高，灭菌效果最好.注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时，在同一表压下所达到的温度值要低，而冷空气排出越少，温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时，为保证达到规定的温度，必须将冷空气完全排除.否则，虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，灭菌就不彻底.3.紫外线 杀菌谱广，但穿透力弱，影响因素多，杀菌效能受到一定限制.紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关.紫外灯杀菌的温度以20~40℃，相对湿度40%~60%为宜。.。
2.微生物学实验室常用的灭菌方法有哪些
主要包括以下三种：干热灭菌；湿热灭菌；紫外灭菌 1.干热灭菌法 1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要用于接种工具灭菌，在火焰上灼烧即可达灭菌目的，火焰灭菌通常用于无菌操作中试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等实验物品的灭菌，防止管口污染。
1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌.将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后，在烤箱内加热至160℃，保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃.此外降温过速，骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密，应有空隙，利于热空气流动，过密，致使温度不均，部分物品灭菌不彻底. 2.湿热灭菌法 通过加压提高蒸汽温度，用高压蒸汽灭菌，温度高，灭菌效果最好. 注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时，在同一表压下所达到的温度值要低，而冷空气排出越少，温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时，为保证达到规定的温度，必须将冷空气完全排除.否则，虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，灭菌就不彻底. 3.紫外线 杀菌谱广，但穿透力弱，影响因素多，杀菌效能受到一定限制. 紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关.紫外灯杀菌的温度以20~40℃，相对湿度40%~60%为宜.。
3.实验室常用的灭菌方法有干热灭菌.高压蒸汽灭菌.紫外线灭菌.过滤除菌
1.高压蒸汽灭菌
为湿热灭菌方法的一种。是微生物培养中最重要的灭菌方法。这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。压力和温度之间的关系见表9-1。
高压蒸汽是最有效的灭菌法，能迅速地达到完全彻底灭菌。一般在15磅/英寸2压力下（121.6℃），15~30分钟，所有微生物包括芽孢在内都可杀死。它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。
进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅，有立式与卧式两种。
可以用电热、煤气、蒸汽等。锅上装有压力表，有的还装有温度计，能及时了解锅内压力及温度。锅上还设有排气口，其作用是在密闭之前，利用蒸汽将锅内的冷空气排净，另外还装有安全活门，如果压力超过一定限度，活门即可自动打开，放出过多的蒸汽。
2.干热灭菌
微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。一般在电烘箱中进行。干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。一般须在160℃左右保持恒温3~4小时，方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。
3.间歇灭菌
各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。
间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间，会被破坏，而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用，又使被处理的物质免遭破坏。
4.紫外线灭菌
紫外线杀菌力最强的是波长2650~2660Å的部分。无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。无菌室和缓冲间的照射时间为20~50分钟（视房间大小而定），接种箱照射10~15分钟即可。
为了加强紫外线灭菌的效果，在照射前，可在无菌室、缓冲间或接种箱内喷洒5%石炭酸，以使空气中附着有微生物的尘埃降落，同时也可以杀死一部分微生物。无菌室的工作台的台面和椅子，可用2~3%的来苏儿擦洗。然后再照射紫外线。由于紫外线对人体有伤害作用，所以人不要直视正在照射的紫外线灯，也不要在照射情况下进行工作。
灭菌后，为了检验紫外线的灭菌效果，可以在无菌室、缓冲间或接种箱内放一套盛有培养基的培养皿，将皿盖打开5~10分钟，盖好后，放入温箱中培养。如果只有一、二个菌落，可认为灭菌效果良好。如杂菌丛生。则需延长照射时间或同时加强其它灭菌措施。
4.实验室消毒灭菌方法
实验室常用的消毒灭菌方法
一、消毒技术（一）明确消毒的主要对象 应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。（二）采取适当的消毒方法 根据消毒对象选择简便
一、消毒技术
（一）明确消毒的主要对象
应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。
（二）采取适当的消毒方法
根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。
医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类：
1. 高度危险的器材
穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部，或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材，如手术器械、注射器、心脏起搏器等。必须选用高效消毒法（灭菌）。
2. 中度危险的器材
仅与皮肤、粘膜密切接触，而不进入无菌组织内，如内窥镜、体温计、氧气管、呼吸机及所属器械、麻醉器械等。应选用中效消毒法，杀灭除芽胞以外的各种微生物。
3. 低度危险器材和物品
不进入人体组织，不接触粘膜，仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触，如果没有足够数量的病原微生物污染，一般并无危害，如口罩、衣被、药杯等，应选用低效消毒法或只作一般卫生处理。只要求去除一般细菌繁殖体和亲脂病毒。
（三）控制影响消毒效果的因素许多因素会影响消毒剂的作用，而且各种消毒剂对这些因素的敏感性差异很大。
1. 微生物的种类
不同类型的病原微生物对消毒剂抵抗力不同，因此，进行消毒时必须区别对待。
1）细菌繁殖体
易被消毒剂消灭，一般革蓝氏阳性细菌对消毒剂较敏感，革蓝氏阴性杆菌则常有较强的抵抗力。繁殖体对热敏感，消毒方法以热力消毒为主。
(2)细菌芽胞
芽胞对消毒因子耐力最强，杀灭细菌芽胞最可靠的方法是热力灭菌，电离辐射和环氧乙烷熏蒸法。在化学消毒剂中，戊二醛、过氧乙酸能杀灭芽胞，但可靠性不如热力灭菌法。
(3)病毒
对消毒因子的耐力因种类不同而有很大差异，亲水病毒的耐力较亲脂病毒强。
(4)真菌
对干燥、日光、紫外线以及多数化学药物耐力较强，但不耐热（60℃1小时杀灭）。
2. 微生物的数量
污染的微生物数量越多需要消毒的时间就越长，剂量越大。
3. 有机物的存在
①有机物在微生物的表面形成保护层妨碍消毒剂与微生物的接触或延迟消毒剂的作用，以致于微生物逐渐产生对药物的适应性。②有机物和消毒剂作用，形成溶解度比原来更低或杀菌作用比原来更弱的化合物。③一部分消毒剂与有机物发生了作用，则对微生物的作用浓度降低。④有机物可中和一部分消毒剂。消毒剂中重金属类、表面活化剂等受有机物影响较大，对戊二醛影响较小。
4. 温度
随着温度的升高，杀菌作用增强，但温度的变化对各种消毒剂影响不同。如甲醛、戊二醛、环氧乙烷的湿度升高1倍时，杀菌效果可增加10倍。而酚类和酒精受温度影响小。
5. PH值
从两方面影响杀菌作用。①对消毒剂的作用：改变其溶解度和分子结构。②pH过高或过低对微生物的生长均有影响。在酸性条件下，细菌表面负电荷减少，阴离子型消毒剂杀菌效果好。在碱性条件下，细菌表面负电荷增多，有利于阳离子型消毒剂发挥作用。
6. 处理剂量与监测
保证消毒、灭菌处理的剂量，加强效果监测，防止再污染。
5.实验室消毒方法有哪些
（一）物理消毒法1.机械消毒 一般应用肥皂刷洗，流水冲净，可消除手上绝大部分甚至全部细菌，使用多层口罩可防止病原体自呼吸道排出或侵入.应用通风装置过滤器可使手术室、实验室及隔离病室的空气，保护无菌状态.2.热力消毒 包括火烧、煮沸、流动蒸气、高热蒸气、干热灭菌等.能使病原体蛋白凝固变性，失去正常代谢机能.（1）火烧 凡经济价值小的污染物，金属器械和尸体等均可用此法.简便经济、效果稳定.（2）煮沸 耐煮物品及一般金属器械均用本法，100℃1~2分钟即完成消毒，但芽胞则须较长时间.炭疽杆菌芽胞须煮沸30分钟，破伤风芽胞需3小时，肉毒杆菌芽胞需6小时.金属器械消毒，加1~2%碳酸钠或0.5%软肥皂等碱性剂，可溶解脂肪，增强杀菌力.棉织物加1%肥皂水15l/kg，有消毒去污之功效.物品煮沸消毒时，不可超过容积3/4，应浸于水面下.注意留空隙，以利对流.（3）流动蒸气消毒 相对湿度80~100%，温度近100℃，利用水蒸气在物何等表面凝聚，放出热能，杀灭病原体.并当蒸气凝聚收缩产生负压时，促进外层热蒸气进入补充，穿至物品深处，加速热量，促进消毒.（4）高压蒸气灭菌 通常压力为98.066kPa，温度121~126℃，15~20分钟即能彻底杀灭细菌芽胞，适用于耐热、潮物品.（5）干热灭菌 干热空气传导差，热容量小，穿透力弱，物体受热较慢.需160~170℃，1~2小时才能灭菌.适用于不能带水份的玻璃容器，金属器械等.不同病原体的热耐受力，以热死亡时间表达.3.辐射消毒 有非电离辐射与电离辐射二种.前者有紫外线，红外线和微波，后者包括丙种射线的高能电子束（阴极射线）.红外线和微波主要依靠产热杀菌.电离辐射设备昂贵，对物品及人体有一定伤害，故使用较少.目前应用最多为紫外线，可引起细胞成份、特别是核酸、原浆蛋白和酸发生变化，导致微生物死亡.紫外线波长范围2100~3280A，杀灭微生物的波长为2000~3000A，以2500~2650A作用最强.对紫外线耐受力以真菌孢子最强，细菌芽胞次之，细菌繁殖体最弱，仅少数例外.紫外线穿透力差，3000A以下者不能透过2mm厚的普通玻璃.空气中尘埃及相对湿度可降低其杀菌效果.对水的穿透力随深度和浊度而降低.但因使用方便，对药品无损伤，故广泛用于空气及一般物品表面消毒.照射人体能发生皮肤红斑，紫外线眼炎和臭氧中毒等.故使用时人应避开或用相应的保护措施.日光曝晒亦依靠其中的紫外线，但由于大气层中的散射和吸收使用，仅39%可达地面，故仅适用于耐力低的微生物，且须较长时间曝晒.此外过滤除菌除实验室应用外，仅换气的建筑中，可采用空气过滤，故一般消毒工作难以应用.（二）化学消毒法 根据对病原体蛋白质作用，分为以下几类.1.凝固蛋白消毒剂包括酚类、酸类和醇类.（1）酚类 主要有酚、来苏、六氯酚等.具有特殊气味，杀菌力有限.可使纺织品变色，橡胶类物品变脆，对皮肤有一定的刺激，故除来苏外应用者较少.酚（石炭酸）（carbolic acid）：无色结晶，有特殊臭味，受潮呈粉红色，但消毒力不减.为细胞原浆毒，对细菌繁殖型1:80~1:110溶液，20℃30分钟可杀死，但不能杀灭芽胞和抵抗力强的病毒.加肥皂可皂化脂肪，溶解蛋白质，促进其渗透，加强消毒效应，但毒性较大，对皮肤有刺激性，具有恶臭，不能用于皮肤消毒.来苏（煤酚皂液）（lysol）：以47.5%甲酚和钾皂配成.红褐色，易溶于水，有去污作用，杀菌力较石炭酚强2~5倍.常用为2~5%水溶液，可用于喷洒、擦试、浸泡容器及洗手等.细菌繁殖型10~15分钟可杀灭，对芽胞效果较差.六氯酚（hexochlorophane）：为双酚化合物，微溶于水，易溶于醇、酯、醚，加碱或肥皂可促进溶解，毒性和刺激性较少，但杀菌力较强.主要用于皮肤消毒.以2.5~3%六氯酚肥皂洗手可减少皮肤细菌80~90%，有报告可产生神经损害，故有宜长期使用.（2）酸类 对细菌繁殖体及芽胞均有杀灭作用.但易损伤物品，故一般不用于居室消毒.5%盐酸可消毒洗涤食具，水果，加15%食盐于2.5%溶液可消毒皮毛及皮革，10l/kg加热30℃浸泡40小时.乳酸常用于空气消毒，100m3空间用10g乳酸薰蒸30分钟，即可杀死葡萄球菌及流感病毒.（3）醇类乙醇（酒精）75%浓度可迅速杀灭细菌繁殖型，对一般病毒作用较慢，对肝炎病毒作用不肯定，对真菌孢子有一定杀灭作用，对芽胞无作用.用于皮肤消毒和体温计浸泡消毒.因不能杀灭芽胞，故不能用于手术器械浸泡消毒.异丙醇（isopropylalcohol）对细菌杀灭能力大于2.溶解蛋白消毒剂 主要为碱性药物，常用有氢氧化钠、石灰等.（1）氯氧化钠 白色结晶，易溶于水，杀菌力强，2~4%溶液能杀灭病毒及细菌繁殖型，10%溶液能杀灭结核杆菌，30%溶液能于10分钟杀灭芽胞，因腐蚀性强，故极少使用，仅用于消灭炭疽菌芽胞.（2）石灰 遇水可产生高温并溶解蛋白质，杀灭病原体.常用10~20%石灰乳消毒排泄物，用量须2倍于排泄物，搅拌后作用4~5小时.20%石灰乳用于消毒炭疽菌污染场所，每4~6小时喷洒一次，连续2~3次.刷墙2次可杀灭结核芽胞杆菌.因性质不稳定，故应用时应新鲜配制.3.氧化蛋白类消毒剂 包括含氯消毒剂和过氧化物类消毒剂.因消毒力强，故目前在医疗防疫工作中应用最广。
6.灭菌方法有哪些
1.干热灭菌法
1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要是用于接种工具灭菌，在火焰上灼烧即可达到彻底灭菌，火焰灭菌通常用于无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口等进行灭菌，阻止管口污染，作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。
1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌。一般将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后，均可在烤箱内干热灭菌。通常加热至160℃，保温2h可完全灭菌。但不宜超过170℃，玻璃量具易变形。降温过速，骤冷易引起玻璃器皿炸裂。干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密，应有空隙，利于热空气流动，过密，致使温度不均，部分物品灭菌不彻底。
2.湿热灭菌法
通过加压提高蒸汽温度，用高压蒸汽灭菌，穿透力强，温度高，灭菌效果最好。
注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气。有冷空气存在时，在同一表压下所达到的温度值要低，而冷空气排出越少，温度就低得越多。在高压蒸汽灭菌时，为保证达到规定的温度，必须将冷空气完全排除。否则，虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，灭菌就不彻底。
3.紫外线 杀菌谱广，但穿透力弱，影响因素多，杀菌效能受到一定限制。
紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关。
我国规定紫外灯照射强度距离1m处不低于70μw/cm2。一般紫外灯使用超过100h，则应更换。表面有尘土，降低灭菌效果。紫外灯杀菌的温度以20~40℃，相对湿度40%~60%为宜。
7.实验室消毒灭菌方法
一、消毒技术 （一）明确消毒的主要对象 应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。
（二）采取适当的消毒方法 根据消毒对象选择简便一、消毒技术（一）明确消毒的主要对象应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。（二）采取适当的消毒方法根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。
医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类：1. 高度危险的器材穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部，或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材，如手术器械、注射器、心脏起搏器等。必须选用高效消毒法（灭菌）。
2. 中度危险的器材仅与皮肤、粘膜密切接触，而不进入无菌组织内，如内窥镜、体温计、氧气管、呼吸机及所属器械、麻醉器械等。应选用中效消毒法，杀灭除芽胞以外的各种微生物。
3. 低度危险器材和物品不进入人体组织，不接触粘膜，仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触，如果没有足够数量的病原微生物污染，一般并无危害，如口罩、衣被、药杯等，应选用低效消毒法或只作一般卫生处理。只要求去除一般细菌繁殖体和亲脂病毒。
（三）控制影响消毒效果的因素 许多因素会影响消毒剂的作用，而且各种消毒剂对这些因素的敏感性差异很大。1. 微生物的种类不同类型的病原微生物对消毒剂抵抗力不同，因此，进行消毒时必须区别对待。
（1）细菌繁殖体易被消毒剂消灭，一般革蓝氏阳性细菌对消毒剂较敏感，革蓝氏阴性杆菌则常有较强的抵抗力。繁殖体对热敏感，消毒方法以热力消毒为主。
（2）细菌芽胞芽胞对消毒因子耐力最强，杀灭细菌芽胞最可靠的方法是热力灭菌，电离辐射和环氧乙烷熏蒸法。在化学消毒剂中，戊二醛、过氧乙酸能杀灭芽胞，但可靠性不如热力灭菌法。
（3）病毒对消毒因子的耐力因种类不同而有很大差异，亲水病毒的耐力较亲脂病毒强。（4）真菌对干燥、日光、紫外线以及多数化学药物耐力较强，但不耐热（60℃1小时杀灭）。
2. 微生物的数量污染的微生物数量越多需要消毒的时间就越长，剂量越大。3. 有机物的存在①有机物在微生物的表面形成保护层妨碍消毒剂与微生物的接触或延迟消毒剂的作用，以致于微生物逐渐产生对药物的适应性。
②有机物和消毒剂作用，形成溶解度比原来更低或杀菌作用比原来更弱的化合物。③一部分消毒剂与有机物发生了作用，则对微生物的作用浓度降低。
④有机物可中和一部分消毒剂。消毒剂中重金属类、表面活化剂等受有机物影响较大，对戊二醛影响较小。
4. 温度随着温度的升高，杀菌作用增强，但温度的变化对各种消毒剂影响不同。如甲醛、戊二醛、环氧乙烷的湿度升高1倍时，杀菌效果可增加10倍。
而酚类和酒精受温度影响小。5. PH值从两方面影响杀菌作用。
①对消毒剂的作用：改变其溶解度和分子结构。②pH过高或过低对微生物的生长均有影响。
在酸性条件下，细菌表面负电荷减少，阴离子型消毒剂杀菌效果好。在碱性条件下，细菌表面负电荷增多，有利于阳离子型消毒剂发挥作用。
6. 处理剂量与监测保证消毒、灭菌处理的剂量，加强效果监测，防止再污染。二、灭菌技术（一）高压蒸汽灭菌法的注意事项第一，无菌包不宜过大（小于50cm*30cm*30cm），不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。
消毒前，打开贮槽或盒的通气孔，有利于蒸汽流通。而且排气时使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。
消毒灭菌完毕，关闭贮槽或盒的通气孔，以保持物品的无菌状态。第二，布类物品应放在金属类物品上，否则蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。
阻碍蒸汽进入包裹中央，严重影响灭菌效果。第三，定期检查灭菌效果。
经高压蒸汽灭菌的无菌包、无菌容器有效期以1周为宜。高压蒸汽灭菌效果的监测：有以下三种方法：第一种是工艺监测，又称程序监测。
根据安装在灭菌器上的量器（压力表、温度表、计时表）、图表、指示针、报警器等，指示灭菌设备工作正常与否。此法能迅速指出灭菌器的故障，但不能确定待灭菌物品是否达到灭菌要求。
此法作为常规监测方法，每次灭菌均应进行第二种是化学指示监测。利用化学指示剂在一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点，以判断是否达到灭菌所需参数。
8.微生物实验室常用的灭菌方法有哪些
常用的灭菌方法主要包括以下三种：干热灭菌；湿热灭菌；紫外灭菌1.干热灭菌法1.1灼烧与火焰灭菌：灼烧主要用于接种工具灭菌，在火焰上灼烧即可达灭菌目的，火焰灭菌通常用于无菌操作中试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等实验物品的灭菌，防止管口污染。
1.2干烤灭菌：利用热辐射及干热空气进行灭菌.将待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品包装后，在烤箱内加热至160℃，保温2h可完全灭菌.但不宜超过170℃.此外降温过速，骤冷易引起玻璃器皿炸裂.干热灭菌时装入干烤箱内的物品切勿紧密，应有空隙，利于热空气流动，过密，致使温度不均，部分物品灭菌不彻底.2.湿热灭菌法通过加压提高蒸汽温度，用高压蒸汽灭菌，温度高，灭菌效果最好.注意事项：1.完全排除高压灭菌器内的冷空气.有冷空气存在时，在同一表压下所达到的温度值要低，而冷空气排出越少，温度就低得越多.在高压蒸汽灭菌时，为保证达到规定的温度，必须将冷空气完全排除.否则，虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，灭菌就不彻底.3.紫外线 杀菌谱广，但穿透力弱，影响因素多，杀菌效能受到一定限制.紫外线消毒效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关.紫外灯杀菌的温度以20~40℃，相对湿度40%~60%为宜。.。
