1、明胶沉淀法:明胶为一类蛋白质类成分,能与鞣质缩合之后产生大分子的沉淀物。使用方法为:将水提液中缓缓加入过量的明胶的饱和氯化钠溶液,搅拌,待沉淀完全之后,抽滤,将沉淀物用丙酮溶解,抽滤,滤液减压回收得到总鞣质。
2、凝胶柱色谱法:这种方法一般在要求得到鞣质单体时采用,将水溶液依次经Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、MCI Gel CHP-20反复柱层析,用水及不同比例的甲醇或乙醇洗脱,各洗脱流分可用TLC或HPLC检识合并,相同者合并,单一组分合并后回收溶剂,即可得到单体。
提出了一种中药提取液去除鞣质的新方法--CuCl2沉淀法.利用鞣质分子中多个酚羟基作为配位体与Cu2+发生配合反应生抄成沉淀的特性,在保证药物有效成分不被破坏的同时,对茶果冬青、五味子、红景天、红景天复方、仙鹤草、山豆根、杜仲、枳实、防己、荷叶、紫苏等多种中药除鞣效率均可超过95%,药物的有效成分损失小,杂质离子的残留量低.试验考察了CuCl2加入量,pH值对鞣质去除率及药物有效成分损失率的影响.结果表明,随着CuCl2用量的增加溶液中鞣质的残留量也将达到一极限值,适宜zd的pH值为6.5~7.5.CuCl2沉淀法是一种新型、理想、高效的除鞣方法,适用于工业化生产.。
用于提取鞣质的最好的原料是刚刚采摘的原料,未变质的气干原料也可应用。采摘的新鲜原料宜立即浸提,也可以用冷冻或浸泡在丙酮中的方法贮存。
浸提用溶剂应该是对鞣质优良好的溶解能力,不与鞣质发生化学反应,浸出杂质少,易于分离的。此外还要低毒、安全、经济、易得。水是鞣质的良好溶剂,有作者采用含亚硫酸钠、亚硫酸氢钠的水溶液提取石榴皮中的鞣质。有机溶剂和水的复合体系(有机溶剂占50%-70%)使用更为普遍,可选的有机溶剂有乙醇、甲醇、丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚等。丙酮-水体系对鞣质溶解能力最强,能够打开鞣质-蛋白质的连接键,减压蒸发易除去丙酮是目前使用最普遍的溶剂体系。
鞣质粗提物中含有大量的糖、蛋白质、脂类等杂质,加上鞣质本身是许多结构和理化性质十分接近的混合物,需进一步分离纯化。通常采用有机溶剂分步萃取的方法进行初步纯化,甲醇能使水解鞣质中的缩酚酸键发生醇解,乙酸乙酯能够溶解多种水解鞣质及低聚的缩合鞣质,乙醚只溶解分子量小的多元酚。初步分离还可以采取皮粉法、醋酸铅沉淀法、氯化钠盐析法、渗析法、超滤法和结晶法等。柱色谱是目前制备纯鞣质及有关化合物的最主要方法,可选用的固定相有硅胶、纤维素、聚酰胺、聚苯乙烯凝胶,聚乙烯凝胶、葡聚糖凝胶等,其中又以葡聚糖凝胶Sephadex LH-20最为常用。
提出了一种中药提取液去除鞣质的新方法--CuCl2沉淀法.利用鞣质分子中多个酚羟基作为配位体与Cu2+发生配合反应生抄成沉淀的特性,在保证药物有效成分不被破坏的同时,对茶果冬青、五味子、红景天、红景天复方、仙鹤草、山豆根、杜仲、枳实、防己、荷叶、紫苏等多种中药除鞣效率均可超过95%,药物的有效成分损失小,杂质离子的残留量低.试验考察了CuCl2加入量,pH值对鞣质去除率及药物有效成分损失率的影响.结果表明,随着CuCl2用量的增加溶液中鞣质的残留量也将达到一极限值,适宜zd的pH值为6.5~7.5.CuCl2沉淀法是一种新型、理想、高效的除鞣方法,适用于工业化生产。
1.提取 提取鞣质的中药原料最好用新鲜原料,且宜立即浸提,也可以用冷冻或浸泡在丙酮中的方法贮存。
原料的干燥宜在尽短的时间内完成,以避免鞣质在水分、日光、氧气和酶的作用下变质医学|教育网搜集整理。 提取将药材粉碎,过筛,用95%乙醇冷浸或渗漉提取,提取液或渗漉液减压浓缩成浸膏。
2.分离 (1)溶剂法:通常将含鞣质的水液先用乙醚等极性小的溶剂萃取,除去极性小的杂质,然后用乙酸乙酯提取,可得到较纯的鞣质。亦可将鞣质粗品溶于少量乙醇和乙酸乙酯中,逐渐加入乙醚医学|教育网搜集整理,鞣质可沉淀析出。
(2)沉淀法:向含鞣质的水液中分批加入明胶溶液,滤取沉淀,用丙酮回流,鞣质溶于丙酮,蛋白质不溶于丙酮而析出。 (3)柱色谱法:普遍采用的固定相是Diaion HP-20,Toyopearl HW-40,Sephadex LH-20及MCIGelC HP-20.以水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮为流动相(洗脱剂)。
(4)高效液相色谱法:HPLC法对鞣质不仅具有良好的分离效果,而且还可以用于判断鞣质分子的大小、各组分的纯度及α、β-异构体等,具有简便、快速、准确、实用性强等优点。
中草药中鞣质的含量测定方法较多,根据鞣质的性质而有皮粉吸附法、重量法、高锰酸钾法、络合滴定法与比色法等,这些方法均各有优缺点。
现简介高锰酸钾法:高锰酸钾法是根据鞣质在酸住溶液中可被高锰酸钾溶液氧化的艇,由消耗高锰酸钾的量来计算中草药中鞣质的含量测定方法较多,根据鞣质的性质而有皮粉吸附法、重量法、高锰酸钾法、络合滴定法与比色法等,这些方法均各有优缺点。现简介高锰酸钾法: 高锰酸钾法是根据鞣质在酸住溶液中可被高锰酸钾溶液氧化的原理,由消耗高锰酸钾的量来计算鞣质含量。
1。
明胶沉淀法与改良明胶沉淀法 明胶是一种蛋白质,与鞣质在水溶液中能形成不溶性的鞣质蛋白,因而可除鞣质,该反应在pH4。0~5。
0时最灵敏。 (1)明胶沉淀法:在中药水煎浓缩液中,加入2%~5%明胶溶液,至不产生沉淀为止,静置、滤过除去沉淀,滤液浓缩后,加乙醇,使含量达75%以上,以除去过量明胶。
(2)改良明胶沉淀法:水煎液浓缩,加入2%~5%明胶后稍经放置,不须滤过即再加入乙醇至含酸量达70%~80%,静置过夜,滤过即得。 2。
醇溶液调pH值法 将中药的水煎液浓缩加入乙醇,使其含酸量达80%或更高,冷处放置,滤除沉淀后,用40%氢氧化钠调至pH为8,此时鞣质生成钠盐且不溶于乙醇而析出,经放置,即可滤过除去。 3。
聚酰胺除鞣质法 聚酰胺又称锦纶、尼龙、卡普隆,是由酰胺聚合而成的高分子化合物。分子内含有许多酰胺键,可与酚类、酸类、醌类、硝基类化合物形成考试,大收集整理氨键而吸附这些物质。
鞣质为多元酚的衍生物,亦可被吸附,从而达到除去的目的。 4。
铅盐沉淀法 醋酸铅在水溶液或醇溶液中能沉淀有机酸、酸性皂甙、树脂、鞣质、色素、蛋白质等。碱式醋酸铅还能沉淀出某些含有醇基、酮类、醛基类物质,以及黄酮类、中性皂甙和少数生物碱。
本法是利用此性质用铅盐从提取液中沉淀出有效成分或分离除去杂质。 由于铅盐对人体有害,溶液中过量的铅必须除尽。
除铅的常用方法有:①硫酸和硫酸钠法;②硫化氢法。
人家都是要提取咖啡因,去除单宁酸,你却要提取单宁酸
只提供一个参考
单宁酸(简称单宁,又称鞣酸或鞣质),分子式C14H10O9,易溶于水、酒精及醚等。
单宁酸主要用途是用于制革业作革鞣剂,印染业作媒染剂、固色剂。单宁酸还是制蓝黑墨水的原料之一,是重要的制药原料。
一、生产原料和原理
单宁酸是一种植物加工制品。五倍子及多种植物的叶、茎、树皮、果壳等都含单宁酸的成分,而以五倍子中含量最高,一般五倍子含单宁55-60.5%。工业上单宁的提取,多以五倍子为原料,经软水浸提、蒸发、干燥等工序。
二、生产工艺
1.除尘轧碎:将五倍子原料经电磁铁除去铁屑,送入轧碎机内轧碎,用筛子过筛,除去五倍子中的虫尸和中的排泄物等杂质。
2.浸提:浸提的时间、温度、加水量和抽出方法对浸提有很大关系。时间过短浸出率低,温度过高浸出液中含非单宁色素就多,影响成品品质;加水量过多,蒸发时间长,多耗蒸发热量,长期加热,成品颜色过深。故浸提方法采用8个提桶(以铜或木材制成,绝不能用铁)逆流循环浸出法,浸提4次。
浸提条件:温度40-70℃,浸提时间72小时,加水量为原料量的4倍(浸提用水须软水或蒸馏水),直接蒸汽加热。
3.冷冻净化:单宁酸浸出液是一种粘稠体,把浓度约8波美度的单宁液,温度降到0℃,大粒子的单宁体就浓缩成胶状物而沉淀,使上层溶液分离出来成溶解度很大的澄清单宁。冷冻净化在木桶澄清槽中进行,冷冻时间一般24小时。
4.浓缩、干燥:将澄清单宁液在真空中下蒸发浓缩和干燥后,即成工业上所用的粉状单宁。工业用粉状单宁含单宁75-80%,灰分3%,水不溶物1.5-2%。医药上用的单宁是把五倍子原料用酒精抽浸,继将浸出液用温和的还原剂——重亚硫酸钠漂白,蒸干后即为药用单宁酸。
第一:溶剂法
溶剂萃取法是传统的提取方法,利用多酚易溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯而不溶于氯仿的性质,将其从中分离出来。此法经过粗提,去杂,重结晶等主要过程得到茶多酚。 一般流程为:茶叶 沸水或含水乙醇浸提 过滤 滤液 氯仿萃取 乙酸乙酯萃取 浓缩干燥 粗品 本法操作简单,易于工业化生产。但消耗大量有机溶剂,且使用了有毒的氯仿,造成有机溶剂残留问题。另外得到的粗品含杂质较多。据文献报道提取率一般为10%~20%。许旋等采用正交试验法优选出了绿茶中茶多酚提取产率的最佳工艺条件为95%乙醇提取1.5h,用等量氯仿萃取2次,最后再用等量乙酸乙酯萃取1次。而另有报道认为提取茶多酚的最佳条件为:乙醇浓度为80%,料液比1:10,提取时间30min。
第二, 金属离子沉淀法
利用茶多酚在一定条件下可以和金属离子络合形成沉淀,在水溶剂中与其它物质分离,再在一定条件下解络合提取茶多酚。 一般流程为:茶叶 沸水或含水乙醇浸提 粗提液 沉淀 过滤 沉淀转溶 萃取 浓缩 干燥 粗品 常用的金属离子有Al3+,Zn2+, Ba2+,Fe3+,Mg2+ ,Ca2+。相同条件下,它们对茶多酚的沉淀顺序是:Al3+>Zn2+>Fe3+>Mg2+>Ba2+>Ca2+。Al3+会引发老年痴呆症, Zn2+为人体所需元素,有报道采用Al3+和Zn2+作为复合沉淀剂,提取效果良好。林建平等采用Se4+提取,是目前文献报道提取效率最高的方法。另外Se4+离子是人体所需的微量元素并具有一定的抗癌作用,此法值得关注。 金属离子沉淀法是常用的茶多酚提取方法。不同金属离子有不同的pH条件
要求,pH值太小沉淀不完全,太大易氧化茶多酚的结构,因此找到合适的pH条件是提取的关键。金属离子的残留是该法的缺点。
第三,层析法
层析法又称色谱法。其原理是利用样品组分在两相之间的分配系数不同而分离。按其分离原理又可分四类,即吸附层析、排阻层析、离子交换层析和分配层析。吸附层析法是利用树脂吸附剂能发生吸附和解吸附的作用特点来达到物质的分离和纯化的目的。吸附树脂对分子的吸附作用力微弱,只要改变体系的亲水疏水平衡条件,就可以引起吸附增加或解吸附。树脂吸附物质后,一般用甲醇等低沸点有机溶剂解吸附,吸附剂选择性特殊,再生简便,稳定性高。据中国农科院茶叶研究所徐向群等研究,国产92-2和92-3吸附树脂可用于分离提取茶多酚〔10〕。王梅等通过对树脂的筛选,确定了NK-S3树脂对茶多酚吸附--解吸附性能良好,选择由乙醇、乙酸乙酯和水组成的混合液为洗脱剂〔11〕。另外,以聚酰胺、硅胶、氧化铝作为填料也有较好的分离效果。排阻层析也称凝胶柱层析,原理是利用凝胶柱的填料对溶解在流动相中的混合物具有不同的排阻作用,从而分离混合物。填料主要有Sephadex LH-20等。离子交换柱层析的原理是利用离子交换柱的可解离不溶性填料对溶解在流动相中的可解离混合物具有不同的离子交换作用分离混合物层析法一般流程为:茶叶 热水或含水乙醇浸提 过滤 上层析柱 洗脱 浓缩 干燥 茶多酚粗品 层析法工艺能耗低,操作简单,不使用毒性强的有机溶剂,产品质量高
第四其它方法 (1)超临界二氧化碳萃取法 (2)滤膜法 (3)超声提取法 (4)微波萃取法.
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