1984 年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA 用作基因探针,同人体核DNA 的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组 成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为"DNA指纹",意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。
DNA指纹的图像在X光胶片中呈一系列条纹,很像商品上的条形码。DNA 指纹图谱,开创了检测DNA 多态性(生物的不同个体或不同种群在DNA结构上存在着差异)的多种多样的手段,如RFLP (限制性内切酶酶切片段长度多态性)分析、串联重复序列分析、RAPD (随机扩增多态性 DNA )分析等等。
各种分析方法均以DNA 的多态性为基础,产生具有高度个体特异性的DNA 指纹图谱,由于DNA 指纹图谱具有高度的变异性和稳定的遗传性,且仍按简单的孟德尔方式遗传,成为目前最具吸引力的遗传标记。
1984 年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA 用作基因探针,同人体核DNA 的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组 成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为"DNA指纹",意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。
DNA指纹的图像在X光胶片中呈一系列条纹,很像商品上的条形码。DNA 指纹图谱,开创了检测DNA 多态性(生物的不同个体或不同种群在DNA结构上存在着差异)的多种多样的手段,如RFLP (限制性内切酶酶切片段长度多态性)分析、串联重复序列分析、RAPD (随机扩增多态性 DNA )分析等等。
各种分析方法均以DNA 的多态性为基础,产生具有高度个体特异性的DNA 指纹图谱,由于DNA 指纹图谱具有高度的变异性和稳定的遗传性,且仍按简单的孟德尔方式遗传,成为目前最具吸引力的遗传标记。DNA指纹图谱分析原理与方法,生物帮上面有更加详细的介绍的, /news/policy/ 生物产业政策,生物产业规划,科研规划。
PCR 作为现代生物学研究的一种常用方法,具有特异性高、灵敏度高、简便节约、经济的优点;但是它最大的缺点是对不同的片段条件不同,所以 很难掌握,而且必须要得到目的基因片段。
RFLP 这种方法比较稳定,但 RFLP 实验操作繁琐,检测时间长,成本 较贵,不太适合大规模的分子育种。 PAPD 相对 RFLP 来说,更加省时省力,不需要进行 DNA 多种酶切、转膜以及探针的制备等多个步骤, 但是它不能用来测定多态性是由父本还是 母本产生的,而 RFLP 这种技术可以做到,而且 PADA 这项技术源于PCR 技术。
当人还处在“人之初”的一个细胞时、就从父母那里各取到了“半张”生命的“施工图”,构成自己独有的DNA谱表。
人的遗传基因约10万个,每个均由A、T、G、C四种核苷酸,按次序排列在两条互补的组成螺旋结构的DNA长链上。核苷酸总数达30亿左右。
目前已经查明,具有遗传作用的DNA像小卫星一样分布在遗传位点上。同一种族的“小卫星”都有相同的核心序列,这是种族遗传和个体具有相似性的物质基础。
同时,“小卫星”的边缘序列又具有高度的可变性,不同个体彼此不同,差异很大,这是种族内个体呈现多样化的重要内因。对遗传位点上的基因,经过放射自显影或酶显色,就可得到像商品条形码一样的图带。
这种图带在个体之间就像人的指纹一样各不相同,具有高度的特异性,这就是DNA指纹图的由来。
(一) DNA鉴定在个人识别方面有着明确的误差估计和较高的准确率,因而更可靠。现代生物识别技术有很多种,如指纹识别、声纹鉴定、DNA鉴定、视网膜识别、虹膜识别、面部识别、唇纹识别等,应用较多的是指纹识别和DNA识别。其中DNA技术应是最重要的识别方法,因为DNA是决定一个人的人体特征和行为特征的最根本的因素[7]。因此,从理论上说DNA技术所能实现的个人识别率应当是很高的。而且DNA技术能明确计算出鉴定结论的误差估计值,因而能减少由鉴定人的主观臆断导致的失误,非常客观。如在Jeffreys首次用DNA技术所做的亲子鉴定中,鉴定结论出错的概率是7*10-22,可以说DNA鉴定结论的准确率几乎为100%[8]。
相反,指纹鉴定因不能量化说明结果的误差率,而显得不够客观,再加上近来由鉴定失误导致的错案的接连出现,使人不禁为其准确性和可靠性担忧[9]。目前对指纹技术的误差率的研究都是零星的、局部的。如对3000枚随机抽取的指纹进行观察,发现两枚指纹的中心、三角部位或外围系统等局部区域细节特征相似的情况较常见,其中三个特征相似的有5对,四个特征相似的有4对,五个特征相似的有2对,甚至七、八、十个特征相似的也有[10]。美国指纹专家曾在大会发言中说:“我们在指纹比对中发现来自于两个人的指纹有四个特征点匹配是常有的事”[11]。到目前为止,还没有系统的统计学方面的研究能充分说明两个人具备共有某一数量偶合点的指纹的可能性究竟有多大。因为这样的研究涉及的因素、指标和统计方法都非常复杂,样本量又很庞大,比如要考虑到如何全面包括选取对象的种族、民族、部落、地区等因素,所有细节特征的种类、形态、位置、大小等因素,使用哪种数据统计模型,样本要多大才具备代表性等等,所以至今还没有人进行。而只有经过全面系统地研究的结果才能被用做评估指纹鉴定结论客观性的统计学基础。缺少这种统计数据基础给相似指纹和变形或模糊指纹的鉴定带来较多麻烦,增大了鉴定失误的可能性。所以,有人把DNA技术看作目前最可靠的个人识别技术。
(二)DNA技术所需检材来源广泛、量微,易于获得。凡是人体细胞,只要含有一定量的大分子DNA,都可用于DNA分析。如血液(斑)、血痕、毛发、肌肉、骨髓、精液(斑)、牙髓及精液与阴道分泌物形成的混合斑、唾液(斑)等,甚至陈旧的、发霉长菌的、经其他方法处理失败的生物斑痕或组织,都可提出DNA用于分析。而且,由于能应用PCR技术将检材中的DNA片段无限扩增,所以DNA技术只需微量检材就能解决问题,有时甚至只需几个人体细胞。上述两方面情况就意味着要获得DNA鉴定所需的检材是比较容易的。
这一优势恰恰是包括指纹技术在内的其他任何生物识别技术所不可比拟的。从现场发现和提取的指纹常常是残缺、模糊、变形或重叠的指纹。由于这些指纹中的纹线特征不够稳定、可靠,甚至无法辨别,对它们的比对分析将难以进行,即便得出结论,也不够可靠、准确。事实上指纹鉴定的失误大多出现在此类情况下。
另外,人们还针对指纹识别技术鉴定潜在指纹的适当性问题提出了质疑,即从现场提取到的指纹图像与遗留人的真实指纹图像的相似性问题难以科学地解决。现场上的指纹大多是不易发现的潜在指纹,需要进行染色显现和胶粘、吸附等转印处理。“在指纹的转印过程中,沉积物(附着物)、变形和色素的综合作用影响了独特的摩擦嵴纹被完全地可靠地转印的能力,手印显现操作的技术水平也可能影响指纹的反映质量,损害指纹的独特性”。“在显现潜在指纹的过程中,压力、变形、染色剂、物屑和操作处理带来的变化影响了原来的摩擦嵴纹的细节特征的稳定性。”[12]因此,有人指出运用各种处理方法从现场提取到的二维指纹图像与原来的指纹在细节特征上是否一致,值得怀疑。而将这样的潜在指纹图像用于比对的做法,其科学性令人担心。因此有人认为,相比之下DNA技术有着更为广阔的应用前景。
DNA分子标记指纹图谱鉴定是根据任何一个品种,都具有该品种所特有的细胞遗传学上的特征,利用分子标记技术,如限制性片段长度多态性(简称RFLP)、随机扩增多态性DNA(简称RAPD)、小卫星DNA、微卫星DNA、扩增片段长度多态性(简称AFLP)等技术,可以直接反应不同品种在DNA水平上的差异,借此来鉴别不同品种,进行品种真实性和品种纯度测定。
所以,利用分子标记技术,通过对鉴定品种的细胞遗传学性状和分子标记特征进行识别来鉴别不同品种的方法,称之为DNA分子标记指纹图谱鉴定。
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