dna的提取鉴定方法(提取DNA的方法)
1.提取DNA的方法有哪些
DNA提取的几种方法
(1).浓盐法
利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提，得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡，使乳化，再离心除去蛋白质，此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中，用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.
也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP，再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白，再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较，后种方法使核酸降解可能少一些.
以稀盐酸溶液提取DNA 时，加入适量去污剂，如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离.在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用，在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠，并称SSC溶液，提取DNA.
(2).阴离子去污剂法：
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性，可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合，因为阴离子去污剂能够破坏这种价键，所以常用阴离子去污剂提取DNA.
(3).苯酚抽提法：
苯酚作为蛋白变性剂，同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时，由于蛋白与DNA 联结键已断，蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶.蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相.离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA .此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出.此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .
( 4).水抽提法：
利用核酸溶解于水的性质，将组织细胞破碎后，用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中，离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇，立即用搅拌法搅出.然后分别用66% 80%和95%乙醇以及丙铜洗涤，最后在空气中干燥，既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高，故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良，在提取过程中加入SDS.
2.DNA的提取方法有多少种
DNA的提取方法有7种：酚抽提法、甲酰胺解聚法、玻璃棒缠绕法、异丙醇bai沉淀法、表面活性剂快速制备法、加热法快速制du备、碱变性快速制备。
DNA的提取原则
1、保证核酸一级结构的完整性；
2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；
3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应zhi降低到最低程度；
4、其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。
扩展资料
提取daoDNA的注意事项
1、各操作内步骤要轻柔，尽量减少DNA的人为降解。
2、注意防止非核酸类成分干扰。
3、要减少DNA的降解，促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀。
4、提取DNA过程中所用到的试剂和器材容要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。
5、所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
参考资料来源：百度百科-dna提取
3.DNA实验室常用的DNA提取方法有哪些
提取DNA主要有SDS和CTAB法，其实提取效果的好坏主要看提取的对象是什么样的材料，在提取之前一定要好好分析材料的特性，然后在设计实验步骤。
一）CTAB法
CTAB是一种去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中（0.7 mol/L NaCl）是可溶的，当降低溶液盐浓度到一定程度（0.3 mol/L NaCl）时，从溶液中沉淀，通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白质、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇。
（二）SDS法
利用高浓度的SDS，在较高温度（55—65℃）条件下裂解细胞，使染色体离析，蛋白质变性，释放出核酸，然后采用提高盐浓度及降低温度的做法使蛋白质及多糖杂质沉淀（最常用的是加入5M的KAc于冰上保温，在低温条件下KAc与蛋白质及多糖结合成不溶物），离心除去沉淀后，上清液中的DNA用酚/氯仿抽提，反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。
以下是在提取热带水果DNA时设计的两种不同方法步骤，对比起来CTAB法好，在禾本科植物效果差不多！
1、CTAB法
1） 在所需量的CTAB抽提液中加入2-巯基乙醇，使终浓度达2%(v/v)。将此溶液预热至65℃。
对于每克新鲜的叶组织大约需要4ml的2-ME/CTAB抽提液。
2） 用液氮（-196℃）或干冰（-78℃）冷却粉碎器/匀浆器，将0.5 g植物组织粉碎成细粉，然后将组织转移到2.0 ml离心管。
3） 加入800 µl预热的2-Me/CTAB，混合使之充分湿润，于65℃温育20 min，不时颠倒混匀。
4） 待冷至室温后，加入800 µl氯仿/异戊醇（24:1），颠倒混匀至溶液呈乳浊状----但不要振荡。25℃，10000 rpm离心10 min。
5） 上清（~700 µl）转移至另一干净的离心管中，加入5 µl RNaseA贮液，37℃温育30 min。
6） 加入700 µl氯仿/异戊醇，颠倒混匀，25℃，10000 rpm离心10 min。
7） 上清（~600 µl）转移至另一干净的1.5 ml离心管中，加入600 µl异丙醇，颠倒混匀，室温或-20℃放置20 min。
8) 25℃，12000 rpm，离心10 min，收集沉淀。
9） 去上清，加1 ml70%乙醇洗涤沉淀两次。（25℃，12000 rpm，离心10 min）
10）凉干DNA，溶于50 µl ddH2O,4℃保存备用。
2、SDS法
① 将0.3 g植物材料于液氮速冻，然后在研钵中将其磨碎，将粉末转至2 ml离心管中。
② 加入1.2 ml预热至65℃的提取缓冲液（其中加入3 μl β—巯基乙醇，增加DNA的稳定性），置65℃水浴中放置30分钟，不时颠倒混匀。
③ 加入0.45 ml 5M的醋酸钾，混匀，冰浴20分钟，在10000 rpm离心20 min。需要的话，Miracloth纱布过滤除去沉淀，上清液转入另一离心管中。
④ 加入等体积氯仿：异戊醇（24:1），轻轻颠倒混匀，12000 rpm离心15 min。
⑤ 转移上清液到另一新离心管中，加5 μl RNaseA贮液，37℃温育30 min。
⑥ 加入等体积氯仿：异戊醇（24:1），轻轻颠倒混匀，12000 rpm离心15 min。
⑦ 转移上清液到另一新离心管中，加入0.7V异丙醇，轻轻颠倒混匀，-20℃放置30分钟沉淀核酸。
⑧ 25℃，12000 rpm，离心10 min，收集沉淀。
⑨ 弃上清，70%乙醇洗两次。
⑩ 凉干DNA，溶于50 µl ddH2O,4℃保存备用。
4.DNA的提取与鉴定
你是说DNA 的提取方法么？现在正在做这方面试验，希望能帮得上你
1） 研磨：取样少许置入1.5ml离心管中，以移液枪加入消化缓冲液600μl，冲入液氮或少许石英砂研磨至澄清。
2） 水浴：水浴温度55℃，水浴时间3-5h左右
3） 酚抽提：每支离心管中加入600μl Tris饱和酚，轻柔的摇晃使固液混合充分。离心机4℃，8000r/min离心10min，以移液枪小心的将上清液取出至新管，重复步骤一次
4) Cl抽提：向抽提出的上清液中加入等体积的Cl液，轻柔的摇晃使充分混匀，高速冷冻离心机4℃，10000r/min离心10min，以液枪小心的将上清液取出。
5) DNA沉淀：向抽提的上清液中加入2倍体积的无水乙醇，并轻柔的摇晃使溶液充分，再置于-20℃冰箱中保存10min后高速冷冻离心机4℃，12000r/min离心5min，小心倾去乙醇，可见DNA沉淀物。
6) DNA 洗涤：向在留有DNA沉淀物的离心管中加入-20℃冰箱中保存的70%乙醇500μl，后离心机4℃，12000r/min离心5min，小心倾去乙醇后可见离心管底白色小圆片状的DNA提取物。将离心管倒置于无菌室内室温至干燥。
7) DNA溶解：向干燥好的DNA提取物中加入30μl去离子水，4℃冰箱保存
5.DNA提取的方法有几种分别是什么,哪种是现在最常用的
关于DNA的提取方法在《分子克隆》一书中有详细介绍，其中最常用的质粒提取方法包括： SDS碱裂解法制备质粒DNA煮沸裂解法制备质粒DNA牙签法小量制备质粒DNASDS裂解法提取质粒DNA 这其中SDS碱裂解法又是最常使用的提取方法。
当然针对不同组织样品DNA的提取方法是不同的，具体还是要参考《分子克隆》等工具书。 另外，针对不同组织的DNA样品，就是都有很多成熟的试剂盒可以使用。
如果不是大批量使用或者经费充足的话，可以考虑购买试剂盒，一般可以提取到更高质量的DNA，并且也可以节约不少自己摸索的时间。
6.DNA的提取方法有多少种
DNA的提取方法有7种：酚抽提法、沉淀法、表面活性剂快速制备法、加热法快速制备、碱变性快速制备。
DNA的提取原则 1、保证核酸一级结构的完整性； 2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子； 3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度； 4、其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。 扩展资料提取DNA的注意事项 1、各操作步骤要轻柔，尽量减少DNA的人为降解。
2、注意防止非核酸类成分干扰。 3、要减少DNA的降解，促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀。
4、提取DNA过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。 5、所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
参考资料来源：百度百科-dna提取。
7.DNA鉴定方法有几种
标准检体︰
1. 口腔黏膜【以本中心提供之口腔棉棒采检，棉棒须干燥保存。】
2. 血液【以紫头EDTA采血管采集2-3ML，室温保存寄送即可。 】
特殊检体︰
1. 血渍【止血棉球，包过伤口的绷带，沾血的纱布或卫生纸，请装入全新纸袋中。】
2. 耳用棉花棒【棉花棒，请装入全新纸袋中。】
3. 手或脚指甲【必需剪下接近皮肤部份，请装入全新纸袋中。】
4. 梳子【必需为同一人使用之梳子，请装入全新纸袋中。】
5. 精液【保险套，内衣，衣服，等等……（1）液体精液： 将精液样本沾到干净的样本收集器上（棉花棒，由本中心提供）.等它干约一个小时左右. （2）干的精液：先将样本收集器沾蒸馏水用湿，再将沾精液沾到样本收集器上.同样等它干约一个小时左右，请装入全新纸袋中。】
6. 牙齿【臼齿，前臼齿，或犬齿 （婴儿齿无法使用），请装入全新纸袋中。】
7. 牙刷【晾干牙刷约30-60分钟，请放入密封保鲜袋中（全新袋子）。】
8. 牙签【请使用时不要用手触碰到，请装入全新纸袋中。】
9. 使用过的手帕【鼻涕，请装入全新纸袋中。】
10. 使用过的卫生纸【鼻涕，请装入全新纸袋中。】
11. 绒毛【10mg请提供母亲检体供比对之用。】
12. 羊水【10ml请提供母亲检体供比对之用。】
13. 组织【5mm冷冻或冷藏保存，或置于PBS buffer中冷藏保存。】
14. 脐带血【1ml请取得母亲血液供比对之用。】
15. 头发【6-10根，需有发根（毛囊）。】
