防止菌种衰退的方法(防止菌种衰退的措施)
1.防止菌种衰退的措施有哪些
(1)讲究配料用于制作原种、栽培种的培养料其原料要新鲜；难吸水的培养料应先用足够的水拌湿，充分拌匀后及时装瓶（袋），上锅灭菌，搁置时间不宜超过5小时。
（2）细心装料根据培养料性质、培养时间、灭菌方法等，选用合适的瓶或袋。培养料装至离棉塞2~3厘米处，抹净瓶（袋）口，然后加棉塞，以免水分和培养料把棉塞玷污。
制作母种注入培养基时要细心，切勿将培养基沾在试管口上。管口棉塞要松紧适中，过松易进杂菌。
（3）灭菌彻底在灭菌时试管要轻放，瓶（袋）摆放要留空隙，棉塞不能互相挤压。根据培养料和容器装置，确定灭菌蒸汽压力（或温度）及灭菌时间。
注意排出冷空气。放气速度要慢。
（4）无菌操作料袋灭菌后冷却至不烫手时再搬动，可减少袋壁破裂。接种器具要保持洁净，用前要消毒。
每个环节都要严格按无菌操作规程进行。（5）精选良种选用无污染、菌丝生长健壮的适龄母种和原种。
接种前认真检查，并且不要用表层菌种接种。接种最好破开瓶底，从下部接至离表面2~3厘米处；若从瓶口取种，应把上层2~3厘米厚的菌种挖掉，然后接种。
（6）净化环境培养室要通风干燥，启用前要清扫、消毒。培养菌种期间，每天要适当通风。
当空气相对湿度大于70%时，要开吸湿机、空调机或用生石灰、木炭等降低室内湿度。（7）定期检查接种后5~7天检查1次是否有污染。
污染杂菌的要及时拣出处理，并且找出原因，加以防治。搬动菌种瓶（袋）要小心轻放。
同时还要预防老鼠、蟑螂等为害和带入杂菌。
2.菌种衰退的原因是什么
菌种退化是客观规律，退化的菌种很难恢复原状。
(1)退化原因
退化菌种的菌丝在培养基上表现生长很慢，长势弱，稀疏，伸入培养基深层无力，分泌色素差；出耳慢，中途停止发育，子实体形态不一致，大小、厚薄不均，颜色改变，产量低。菌种退化原因主要有以下几方面：
①基因变异。遗传特性的表现是基因与环境因子共同作用的结果。当基因往性状差的方向发生变异时，即使环境条件适宜，也必然造成种性退化。
②无限继代。制种技术和条件上的差别，只作组织分离、不作出耳鉴定，无限继代、无限制地转管，这些做法都加速了菌种的退化。
③营养不良。长期使用单一种类和配方、成分基本相同的培养基，造成营养不能达到生理要求，菌丝生长活力由强变弱，衰老退化。
④环境欠佳。菌丝生长发育期环境不良，杂菌污染，也会加速菌种退化。
(2)防止措施
根据菌种衰老退化的原因，要针对性地采取以下措施：
①减少扩接。菌种的退化、种性变异，是在繁殖过程中发生的，可采用控制菌种移接次数来防止。当获得优良菌种后，严格控制转管次数。生产中应减少菌种扩接次数。
②防止突变。采用0~4℃低温保藏菌种，有条件时在液氮超低温条件下保藏。
③分离复壮。优质菌种，需要经常复壮。每次生产出耳后，应挑选优良子实体，进行组织分离。每年进行一次孢子分离，经出耳鉴定后，选择性状优良的再进行组织分离。总之，有性孢子分离与无性组织分离要交替使用。用有性繁殖来发现好的变异菌株，用组织分离来巩固这些优良菌株的遗传特性。复壮的措施很多，诸如更换培养基、创造适宜环境、防止杂菌污染及避免多品种混合栽培等。
3.防止菌种退化的措施是什么
防止菌种退化的措施（1）防止菌种的混杂在菌种转管，出菇试验等工作中，均应 加强品种隔离，减少品种间的混杂，以保证优良品种的遗传组成在 较长时间内能保持相对的稳定。
（2）控制菌种传代次数菌种传代次数越多，产生变异的概率 就越高，因此菌种发生退化的概率就会越多，生产中应严格控制菌 种的移接代数。 （3）采用有效的菌种保藏方法保存菌种菌种保存应是短期、中期和长期三者相结合，根据不同的要求从不同保藏方法中进行 转接，确保菌种能长期保持该品种的原有优良性状。
（4）创造菌种生长良好营养条件和外界环境菌种培养基的 营养条件应适宜，才能使菌种生长健壮，减少退化的发生。 营养不 足和过于丰富对菌种生长均不利。
菌种的生长繁殖受到物理、化 学、生物等外界条件的影响，如条件适宜，菌种生长正常，不易退 化，不相适宜，则会引起菌种的退化。（5）防止病毒感染对菌种可能遭受病毒的感染应保持警惕。
及时检验有疑问的菌种。淘汰感染病毒菌株，尤其是淘汰病毒粒 子含量大，菌丝体及子实体性状已受到严重影响的菌株。
4.如何防止菌种退化
遗传是相对的，变异是绝对的。
因此，要求一个菌种永远不衰退 是不可能的，而积极采取措施，使菌种优良特性的退化延缓是可以做到的。采用减少传代、经常纯化、创造良好的培养条件、用单细胞移 种传代以及科学保藏等措施，不但可以使菌种保持优良的生产能力， 而且还能使已退化的菌种得到恢复提高。
酿造调味品工业生产中使用的优良菌种来之不易，应该尽可能地把菌种的退化控制在最低限度， 具体措施如下：1。 尽量减少传代尽量避免不必要的移种和传代，并将必要的传代控制在最低限 度，以减少自发突变的概率。
微生物都存在自发突变，而且这种现象都是在繁殖过程中发生或表现出来的。 菌种的传代次数越多，繁殖越 频繁，产生突变的概率就越高，因而发生衰退的机会就越多。
所以， 不论在实验室还是在生产实践中，必须严格控制菌种的传代次数。通常，在发酵工厂生产菌种的传代中，首先要选择好性能优良的沙土管 斜面原种，并保藏一定数量的沙土管原种。
每支斜面原种扩培成多支第二代斜面，每批生产用一支第二代斜面，即采用第三代的扩培物用于发酵生产。新鲜的二代斜面用完以后，再从第二支沙土管斜面原种 活化扩培为多支第二代斜面用于生产中，直到所有新的第二代斜面用 完以后，再从沙土管原种出发扩培，如此往复，既限制了传代次数，防止自发突变和低产菌株的进一步扩大，又保证了生产的持续稳定的 进行，是实际生产中防止菌种退化的有效措施。
而采用良好的菌种保 藏方法，也能大大减少不必要的移种和传代。2。
经常纯化菌种菌种的纯化工作，一般是采取常规的分离纯化方法来进行的。具 体的菌种纯化方法与本章中纯种分离方法相同。
对于不产孢子的丝状菌的分离纯化，与前述的两类方法不同，即将菌种的菌丝打成断片或 碎片，分离于琼脂平板上，形成单个菌落，然后用灭菌小刀切取菌落 周缘的顶端菌丝，进行分离培养；或用毛细管插人菌丝顶端以截取单细胞用于分离培养。 3。
创造良好的培养条件创造一个适合菌种的生长条件，就可以在一定程度上防止菌种退 化。例如，在赤霉素生产菌（Ge66erreZZa/M）i々Mrro0的培养基中，加入糖蜜、天冬酰胺、谷氨酰胺、5'-核苷酸或甘露醇等丰富营养物 时，具有防止菌种退化的效果；在栖土曲霉3。
942的培养过程中，改变培养温度，即由28〜30°C提高到30〜34°C可防止其产孢子能力的衰退。为了防止菌种退化，一定要选择合适的培养基和培养条件。
对一 个优良的菌种来说，究竟什么样的培养基能保持菌种的优良特性，应进行专门的探讨研究。国外一些专业保藏菌种的公司，对于一些有价 值的菌种都要设计20多种培养基，分别接种琼脂平板，在一定温度 下培养到菌落成熟，根据形态变化来确定哪种培养基引起的变异最大。
而对变异小或无变异的对应培养基进一步进行菌种移种传代试验，测定传代过程中菌种产量的稳定性。然后，以此来确定作为菌种 保藏的合适的培养基。
4。 用单核细胞传代霉菌、放线菌的菌丝是多核的，其中也存在着异核体或部分结合 体。
因此，用菌丝接种、传代易产生不纯细胞，经几代移种，必定会出现退化现象，故常用单核的孢子移种传代。 为了避免移种孢子时带 人菌丝，可以采用灭菌的小棉花团裹在接种针前端轻轻蘸取菌落表面 的孢子进行传代，其效果较好。
5。 采用有效的菌种保藏方法在用于工业生产的菌种中，重要的性状都属于数量性状，而这类 性状恰好是最易退化的。
即使在较好的保藏条件下，仍然存在这种现象。 温度对微生物细胞的突变影响很大。
在高温条件下要比在低温条 件下发生突变的机会大得多。一般情况下，需在0〜4°c的条件下保存 菌种，如果条件允许，可以在一196〜一20°C的超低温度下保存菌种。
对菌种保藏来讲，良好的保藏条件也是极其重要的。首先，作为 菌种保藏的培养基，一般应该和生产菌种的培养基成分基本相同。
而用于斜面保藏菌种的培养基，其组成则有所不同，一般含有较多的有 机氮，少含或不含糖分，总量不超过2%，以防止pH值的变化。对 产腺苷的黄嘌呤缺陷型菌株，在培养基中加人黄嘌呤、鸟嘌呤、组氨酸和苏氨酸等，可使其回复突变率下降，生长繁殖速度减缓，从而延 缓退化现象的出现。
总之，保藏菌种的培养基的成分，既要有益于菌 种生长繁殖，又要有益于菌种保藏期间保持其优良性状。
5.怎样防止菌种退化
菌种突然或逐渐丧失原有的生活力和丰产性能的现象， 称为菌种退化。
（1）菌种退化的原因菌种退化的内因即遗传性能发生 了变化。食用菌在自然界互相杂交能引起遗传性状的分离变 化；菌种生产过程中营养的缺乏，温度的变化以及杂菌的污染 等，特别是病毒感染。
此外，外界条件使某一菌株不能获得适 宜的生长条件，从而使其失去优良菌株性状；某一菌株继代 （转接）次数过多，使用时间过长，个体的衰老，引起生活功能 的下降，逐渐失去其生产价值。（2） 防止菌种退化的措施根据退化的原因，采取相应的 措施，使生活力和生产性状退化的菌种，提高或恢复到原有的优良性状，这种做法称为菌种复壮。
菌种复壮常用的方法如 下：避免转管移植的次数过多。生产分离提纯的母种时，第一 次接种的试管数量要多，以后每次转接母种时，只取用一部分原始种试管，多数原始种试管仍保存在冰箱里，留作分次使 用。
这样可以避免杂菌的污染，同时也可以减低菌种退化的 速度；改变培养基的配方。 培养某一菌种所用营养成分的配方，每隔一段时间需要变换营养丰富的培养基的成分，能使衰 弱的菌丝恢复健壮；定期组织分离。
每年在第一潮子实体出 现时，采集有代表性的子实体进行组织分离，经提纯的母种用于生产。在有条件的单位，也可通过遗传育种的方法获得母 种的复壮。
