采用滤膜法进行微生物检测是一种国际公认的微生物标准检验方法,其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。
赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序。 滤膜法微生物检测: 将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。
样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关。
滤膜法的优点: - 与直接法比较,可以检测大量的样品 - 浓缩效应使微生物检测的准确度提高 - 带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档 - 可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果 操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可。
在实际工作中,环境监测可分为两类。
一是污染源监测,即对污染物排放情况进行监测。一般是在污染物排出口,定期、定点采集样品,分析、测定不同形态有害物质的浓度、排放量以及时空分布规律。
二是环境监测,也就是对环境中的污染物质及其变化规律、环境影响进行分析、监视,明确其数值、范围、污染程度,通过综合分析描述环境质量状况和发展趋势。 按照环境要素的不同,环境监测分为大气污染监测、水体污染监测、土壤污染监测、生物污染监测等;根据污染物的性质又可分为化学毒物监测、热污染监测、噪声污染监测、放射性污染监测等。
大气污染监测常用的监测项目主要包括气象参数和总悬浮颗粒物(TSP)、降尘、一氧化碳(CO)、二氧化硫(SO2)、碳氢化合物(HC)、氮氧化物(NOx)、臭氧(O3)等;地表水水质监测的项目一般包括水文、气象参数以及温度、酸碱度(pH)、悬浮固体(SS)、溶解氧(DO)、生物耗氧量(BOD)、化学耗氧量(COD)、某些毒物等。 环境监测是一项技术含量很高的工作,必须由专业人员遵照国家和国际上规定的监测方法和标准来进行,监测结果要编制成专业文件。
对监测过程要进行全面的质量控制,保证数据的可靠性 环境标准是对某些环境要素所作。
生化需氧量()简称BOD。
是表示水中有机物等需氧污染物质含量的一项综合指标。它说明水中有机物处于微生物的生化作用进行氧化分解,使之无机化或气体化时所消耗水中溶解氧的总数量,其单位以ppm(毫克/升)表示。
BOD一般指的是微生物可降解的有机物的量,即废水中可降解有机物的量。BOD的测定方法包括:1.标准稀释法这种方法是最经典的也是最常用的方法。
简单的说,就是测定在20±1℃温度下培养五天前后溶液中的溶氧量的差值。求出来的BOD值称为“五日生化需氧量(BOD5)”。
2.生物传感器法其原理是以一定的流量使水样及空气进入流通量池中与微生物传感器接触,水样中溶解性可升华降解的有机物受菌膜的扩散速度达到恒定时,扩散到氧电极表面上的氧质量也达到恒定并且产生一恒定电流,由于该电流与水样中可生化降解的有机物的差值与氧的减少量有定量关系,据此可算出水样的生化需氧量。通常用BOD5标准样品对比,以换算出水样的BOD5的值。
3.活性污泥曝气降解法控制温度为30℃-35℃,利用活性污泥强制曝气降解样品2小时,经重铬酸钾消解生物降解后的样品,测定生物降解前后的化学计量需氧量,其差值即为BOD。根据与标准方法的对比实验结果,可换算成为BOD5值。
4.测压法在密闭的培养瓶中,水样中溶解氧被微生物消耗,微生物因呼吸作用产生与耗氧量相当的CO2,当CO2被吸收后使密闭系统的压力降低,根据压力测得的压降可求出水样的BOD值。
药动学重要参数及意义:
1、消除半衰期:血药浓度下降一半所需的时间。是决定给药间隔时间的重要参数之一。
2、生物利用度:药物吸收速度与程度的一种量度。可药时曲线下面积AUC计算,F=口服AUC/注射AUC。
3、表观分布容积Vd :是指血药浓度与体内药物量间的一个比值,Vd=A/C=体内药量/血药浓度。可反映药物分布的广泛程度或药物与组织结合的程度。
4、药-时曲线下面积AUC 代表一次用药后的吸收总量,反映药物的吸收程度。
1.方法:检测细菌总数、大肠菌群、真菌和HBsAg 四项指
标。
2. 细菌菌落总数:用浸有生理盐水的棉拭子在5 x 5cm2灭
菌规格板内涂抹受检物品表面10 次,将棉拭子放入10ml 灭菌
生理盐水中。按部颁《消毒技术规范》(1991)方法检验。
3.大肠杆菌:按上法采样将棉拭子放入胆盐乳糖管中。按
卫生部《消毒技术规范》(1991)方法检验,记录阳性、阴性数。
4 真菌:按(2)方法采样,将样品按1:10稀释,用H-92
微型混合器震荡30min,使真菌孢子充分散开,接种于马铃薯
葡萄糖琼脂培养基,28°C培养7d,记录平皿阳性、阴性数。
5 HBsAg:用蘸有1%血清磷酸盐缓冲液(0.01M,pH 7.2-7.4)棉拭子在5 x 5cm2规格板内涂抹物体表面10次,浸入1ml
磷酸盐缓冲液中。按部颁《消毒技术规范》(1991)方法检验.
注:王云峰,王有森,白竟玉,等.消毒技术规范〔M〕. 北京:卫生部,1991:100-113
目前的话,一般是血液和唾液两种采样方式。我之前做过的盛景基因公司他们是通过唾液采样,他们的流程如下:
【采集方法】
1.在采集唾液样本前30分钟,请用饮用水将口腔内的杂物洗漱干净。
2.用舌尖抵住上颚或下颚齿根以富集唾液,向采集漏斗中轻轻吐入唾液,直至液体唾液(非气泡)达到刻度线高度。
3.手持唾液采集管,令其处于直立。并用另一只手协助将采集漏斗旋下。
4.从采集管底部取下采集管管盖,并用管盖将采集管拧紧。
5.上下颠倒采集管5次,使唾液与唾液保存液充分混匀。丢弃使用过的采集漏斗。
【注意事项】
1.采样前30分钟,请勿饮食、饮水、吸烟或嚼口香糖等。
2.多数人按照上述步骤采集唾液样本需要2~5分钟的时间。
3.开始采集唾液之前,请放松脸颊,并用手指轻轻按摩脸颊15~30秒以产生唾液。
4.确认唾液样本采集管的外包装完好,检查唾液保存管,确认无漏液。
5.室温储存条件下,本产品收集的唾液样本可稳定保存12个月,保存期限内,可以分离高质量的高分子量DNA片段。鉴于样本存在个体差异,不同样本的具体保存期限有所波动。
6.本产品为一次性使用,禁止二次使用,禁止不同个体使用同一个唾液采集管。
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