细胞器分离方法(用什么方法分离细胞器)

1.用什么方法分离细胞器

细胞器的分离主要用到的是离心技术。

主要用到：（一）、差速离心（differential centrifugation）在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器。在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为：核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。

由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠，而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中，一般重复2~3次效果会好一些。差速离心只用于分离大小悬殊的细胞，更多用于分离细胞器。

通过差速离心可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。（二）、密度梯度离心（density gradient centrifugation）用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。

这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种（图2-23）。密度梯度离心常用的介质为氯化铯，蔗糖和多聚蔗糖。

分离活细胞的介质要求：1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；2)PH中性或易调为中性；3）浓度大时渗透压不大；4）对细胞无毒。