免疫缺陷检查方法(免疫学的检测方法)
1.免疫学的检测方法有哪些
免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫。
体液免疫：
所谓体液免疫，即以B细胞产生抗体来达到保护目的的免疫机制。负责体液免疫的细胞是B细胞。体液免疫的抗原多为相对分子质量在10,000以上的蛋白质和多糖大分子，病毒颗粒和细菌表面都带有不同的抗原，所以都能引起体液免疫。
临床上一个反复发作的化脓感染，常使医生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原发免疫缺陷发病年龄很小，而继发免疫缺陷病人多在30岁以上。绝大多数免疫缺陷病人多表现为体液和细胞免疫同时受损，所以应全面检查这两方面的功能。遗憾的是，目前应用的检测方法的局限性，其结果常难以得出明确结论。
细胞免疫：
T细胞受到抗原刺激后，增殖、分化、转化为致敏T细胞（也叫效应T细胞），当相同抗原再次进入机体的细胞中时，致敏T细胞（效应T细胞）对抗原的直接杀伤作用及致敏T细胞所释放的细胞因子的协同杀伤作用，统称为细胞免疫。
在抗感染免疫中，细胞免疫主要参与对胞内寄生的病原微生物的免疫应答及对肿瘤细胞的免疫应答，参与迟发型变态反应和自身免疫病的形成，参与移植排斥反应及对体液免疫的调节。也可以说，在抗感染免疫中，细胞免疫既是抗感染免疫的主要力量，参与免疫防护；又是导致免疫病理的重要因素。
2.免疫诊断方法有哪些
应用免疫学的理论、技术和方法诊断各种疾病和测定免疫状态。
在医学上，它是确定疾病的病因和病变部位，或是确定机体免疫状态是否正常的重要方法。此外，还应用于法医学的血迹鉴定、生物化学的血清成分鉴定和物种进化关系的研究等。
可在体内和体外进行。从免疫学的角度免疫诊断可应用于：（1）检查免疫器官和功能发生改变的疾病：如免疫缺陷病、自身免疫病。
（2）由免疫机制引起的疾病：如输血反应、移植排斥反应。（3）一些内分泌性的疾病：从临床学的角度来说，免疫诊断可应用于检查传染性疾病、免疫性疾病、肿瘤和其他临床各科疾病。
就所检测的反应物免疫诊断大致可以分为两类，即：（1）免疫血清学诊断：检测病人血清或组织内有无特异性抗体或特异性抗原。（2）免疫细胞学诊断：测定病人细胞免疫力的有无和强弱。
免疫诊断须体现3项要求：（1）特异性强，尽量不出现交叉反应，不出现假阳性，以保证诊断的准确性。（2）灵敏度高，能测出微量反应物质和轻微的异常变化，有利于早期诊断和排除可疑病例。
（3）简便、快速、安全。
3.免疫缺陷病需要检查哪些
对所有免疫缺陷病例，必须选作一些实验室检查以确立诊断；而在作相应治疗之前，通常还须作一些先进试验对疾病作进一步分类。
一般来说，多数机构和医院能作筛查试验，多数大医院能作先进试验，特殊试验则只有一些实验室或配备高水平免疫学实验室的医院才能进行。 当怀疑免疫缺陷时，建议进行实验室筛查试验，包括全部血细胞计数及分类计数和血小板计数；测定IgG,IgM和IgA浓度；抗体功能测定；感染的临床和实验室判断。
血细胞计数可发现贫血，血小板减少，中性粒细胞减少或白细胞增多。应计数淋巴细胞总数，如有淋巴细胞减少（免疫球蛋白浓度测定也属于最先筛查的项目之一，但IgD和IgE浓度最初不测。
对于免疫球蛋白的解释需谨慎从事，因为有显着的年龄性差异；以成人的标准，所有2~6个月的婴儿均有低γ球蛋白血症。因此免疫球蛋白浓度必须与同年龄对照组的正常浓度相比较。
一般免疫球蛋白浓度在同年龄2SD（标准差）范围内为正常。总免疫球蛋白浓度（IgG+IgM+IgA）>600mg/dl，或IgG>400mg/dl同时抗体功能试验正常者，可排除抗体缺陷。
总免疫球蛋白浓度抗体筛查试验也被推荐用于初筛。用同种凝集素滴度（抗A和/或抗B）估计IgM抗体功能。
除若所有这些筛查试验均正常，则免疫缺陷（特别是抗体缺陷）可排除。但若证实有慢性感染，病史毫无疑问或筛查试验阳性，则必须进一步作高级试验检查。
B细胞（抗体）缺陷的试验只要总免疫球蛋白很低（若总免疫球蛋白较低，可用荧光抗B细胞特异抗体（如CD19,CD20）经流式细胞仪来计算B细胞。 正常外周血中淋巴细胞的10%~20%为膜表面免疫球蛋白阳性细胞（B细胞）。
其次，进行血清IgG亚类，IgD和IgE浓度测定。IgG1亚类浓度（与IgG相似）与年龄明显有关，通常在2岁后，IgG1某些情况需作其他B细胞缺陷的试验（表147-5）。
在淋巴结病时或者为了除外恶性肿瘤或感染时，可作淋巴结活检（有时需先免疫邻近的肢体）。IgG浓度正常或接近正常而有抗体功能缺陷时，需作IgG亚类分析。
可能存在4个亚类中某一亚类的选择性缺陷。如怀疑有IgG分解加速或经皮肤或胃肠道丢失时，则作IgG寿命检查；如病人IgG浓度低下，可静脉给予大剂量免疫球蛋白，然后每日测定IgG浓度以确定其半衰期。
若有严重感染，可测分泌物（泪液或唾液）中的免疫球蛋白浓度。还可体外检测IgG合成以及对特异抗原如噬菌体或钥孔血蓝蛋白的抗体反应来确定抗体合成阻断的确切部位。
在一些遗传缺陷的疾病，经用特殊的实验室试验能发现突变的基因或突变的基因产物（如在X连锁无γ球蛋白血症所证实的Bruton酪氨酸激酶基因）T细胞缺陷的试验持久而极度严重的淋巴细胞减少提示T细胞缺陷。 然而淋巴细胞减少并不常见。
胸部X线检查是筛查婴儿T细胞缺陷的有用方法。对新生儿特别是在感染或其他能使胸腺变小的应激状况发作前作X线检查，如看不到胸腺影像，提示有T细胞缺陷。
迟发型皮肤超敏反应试验对2岁以上儿童是有价值的筛查T细胞缺陷的试验。可用以下的抗原：流行性腮腺炎抗原，念珠菌抗原（1:100），液体破伤风类毒素（1:10）和毛癣菌抗原。
几乎所有成人以及大多数免疫婴儿和儿童会对其中一种或几种抗原发生反应，于48小时出现直径>5mm的红斑和硬结。存在一个或一个以上阳性迟发型皮肤试验通常表明T细胞系统未受损。
诊断细胞免疫最有价值的先进试验是T细胞和T细胞亚群（辅助/诱导细胞和抑制/细胞毒细胞）的计数。 通常采用T细胞特异性的鼠单克隆抗体经流式细胞仪作检测。
应用全T细胞抗体（抗CD3，抗CD2）检测总T细胞，抗CD4抗体检测T辅助/诱导细胞，抗CD8抗体检测T抑制/细胞毒细胞（这些试验已替代羊红细胞花结法计数T细胞）。当辅助T细胞（CD4）计数1。
0。此比值倒置也提示T细胞免疫缺陷（在艾滋病CD4/CD8比值降低表示免疫系统进行性受损）。
单克隆抗体也能有效地检测激活的细胞（CD25），自然杀伤细胞（CD16和CD56）和不成熟的T细胞胸腺细胞）抗原（CD1）。测量病人淋巴细胞增殖和增大（转化）能力的另一种有效的先进试验是将有丝分裂原（如植物血凝素，刀豆素A），照射过的同种白细胞（用于混和白细胞反应）或病人过去接触过的抗原，与淋巴细胞共同培养。
在这些刺激之下，正常淋巴细胞急速分裂，这可用形态学方法或将放射性胸腺嘧啶掺入分裂细胞的方法予以测定。增殖程度通常用指数表示---受刺激细胞的每分钟计数（CPM）与等量未受刺激细胞的每分钟计数的比值。
T细胞缺陷病人存在与免疫受损程度一致的增殖应答低下甚至消失的现象。 对有丝分裂原（能激活所有细胞）的增殖反应（刺激指数50~100）明显地高于对抗原或同种细胞的反应（刺激指数3~30）。
还可进行特殊试验测定在有丝分裂原或抗原刺激后淋巴因子的生成。淋巴因子有30多种，但通常测定γ-干扰素（IFN-γ）和白介素-2(IL-2)，白介素-4(IL-4)和α-肿瘤坏死因子。
部分病人有相应的增殖反应，但淋巴因子生成低下。另一组特殊试验可测定细胞毒功能。
使用不同的肿瘤细胞或病毒感染的靶细胞测定不同类型的细胞毒（自然杀伤细胞，抗体依赖性细胞毒或细胞。
