1、色谱方法根据分离机制的不同可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶过滤(分子筛)色谱和亲和色谱等。
2、(1)吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂时,由于该吸附剂对不同物质有不同的吸附力而使混合物分离的方法。(2)分配色谱系法是利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离。
(3)离子交换色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法。凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法进行分离。
(4)凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。(5)亲和色谱法是将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。
柱色谱法,又称层析法。是一种以分配平衡为机理的分配方法。柱色谱主要分为吸附柱色谱、分配柱色谱两种。
1. 吸附柱色谱原理
在一定条件下,硅胶与被分离物质之间产生作用,这种作用主要是物理和化学作用两种.物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力.化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。除另有规定外,通常多采用直径为0.07~0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各品种项下的规定。
在吸附柱色谱中,吸附剂是固定相,洗脱剂是流动相,相当于薄层色谱中的展开剂。吸附剂的基本原理与吸附薄层色谱相同,也是基于各组分与吸附剂间存在的吸附强弱差异,通过使之在柱色谱上反复进行吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程而完成的。所不同的是,在进行柱色谱的过程中,混合样品一般是加在色谱柱的顶端,流动相从色谱柱顶端流经色谱柱,并不断地从柱中流出。由于混合样中的各组分与吸附剂的吸附作用强弱不同,因此各组分随流动相在柱中的移动速度也不同,最终导致各组分按顺序从色谱柱中流出。如果分步接收流出的洗脱液,便可达到混合物分离的目的。一般与吸附剂作用较弱的成分先流出,与吸附作用较强的成分后流出。
2. 分配柱色谱原理
方法和吸附柱色谱基本一致。装柱前,先将载体和固定液混合,然后分次移入色谱柱中并用带有平面的玻棒压紧;供试品可溶于固定液,混以少量载体,加在预制好的色谱柱上端。洗脱剂需先加固定液混合使之饱和,以避免洗脱过程中两相分配的改变。
常见的色谱分离方法有哪些
液相色谱按分离机理分为吸附、分配、交换、排阻以及亲和五种类型.
利用组分在吸附剂(固定相)上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法,称为吸附色谱法.固定相是固体,目前这种分离模式在液相色谱中用途很小.
利用组分在固定液或者键合固定相(固定相)中溶解度不同而达到分离的方法称为分配色谱法.固定相是涂覆的固定液或者键合的固定相,是目前主流的分离模式,涵盖了目前液相色谱应用范围的大部.
利用组分在离子交换剂(固定相)上的亲和力大小不同而达到分离的方法,称为离子交换色谱法.该分离模式主要用来分离离子型化合物,正是由于如此,现在离子色谱已经从液相色谱中分离出来,称为离子色谱.
利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的方法,称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法.这个主要用来分离高分子子化合物,比如蛋白、比如聚合物.
利用不同组分与固定相(固定化分子)的高专属性亲和力进行分离的称为亲和色谱法,常用于蛋白质分离.
色谱分析法 chromatography 基于 混合 物 各组 分在体系中 两相 的物 理化学性能差异(如吸附、分配差异等)而进行分离和分析的方法。
国际公认俄国M.C.茨维特为色谱法的创始人。 色谱法体系中的两相作相对运动时,通常其中一个相是固定不动的 ,称为固定相 ;另一相是移动的 , 称为流动相。
在色谱分析过程中,物质的迁移速度取决于它们与固定相和流动相的相对作用力。溶质和两相的吸引力是分子间的作用力,包括色散力、诱导效应、场间效应、氢键力和路易斯酸碱相互作用。
对于离子,还有离子间的静电吸引力。被较强吸引在固定相上的溶质相对滞后于较强地吸引在流动相中的溶质,随着移动的反复进行与多次分配,使混合物中的各组分得到分离。
色谱分析法的分类比较复杂。根据流动相和固定相的不同,色谱法分为气相色谱法和液相色谱法。
①气相色谱法的流动相是气体 ,又可分为 : 气固色谱法 ,其流动相是气体,固定相为固体;气液色谱法,其流动相是气体,固定相是涂在惰性固体上的液体。②液相色谱法的流动相是液体,又可分为?液固色谱法,其流动相是液体,固定相是固体;②液液色谱法,其流动相和固定相均是液体。
按吸附剂及其使用形式可分为柱色谱、纸色谱和薄层色谱。按吸附力可分为吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱和凝胶渗透色谱。
按色谱操作终止的方法可分为展开色谱和洗脱色谱。按进样方法可分为区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。
经色谱分离出的各组分,与已知标准样品对照进行定性分析。现代化的色谱-质谱联用或色谱-光谱联用仪器,配备有丰富的谱图库和微处理机。
色谱柱流出的组分直接送入质谱和光谱仪进行定性鉴定和数据的定量处理。开发智能化色谱分析是发展的主要方向。
色谱法的特点是?①分离效率高。可分离性质十分相近的物质,可将含有上百种组分的复杂混合物进行分离。
②分离速度快。几分钟到几十分钟就能完成一次复杂物质的分离操作。
③灵敏度高。能检测含量在10-12克以下的物质。
④可进行大规模的纯物质制备。 色谱法在化工、石油、生物化学、医药卫生、环境保护、食品检验、法医检验、农业等各个领域都有广泛的应用。
在各种色谱法中,以气液色谱法和液固色谱法应用最广。气相色谱法分离中、小分子化合物比较理想。
中等大小的分子可用液液色谱和液固色谱分离。离子交换色谱一般用于有离子基团的物质。
分子尺寸再大时,用凝胶渗透色谱分离。薄层色谱和纸色谱法的分析速度快、方便、成本低,柱色谱比薄层色谱和纸色谱具有更高的分辨能力。
在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相.
谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的.
含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱子或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面;当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用,由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。
色谱分离法;chromatographic separation
在工业上应用色谱分析原理分离性质近似组分的方法。使溶液分批通过垂直的填充吸附剂固定床,将各种组分分离精制。色谱柱内的填充吸附剂是多孔的惰性固体,用非挥发性的惰性液体涂渍。被分离溶液的溶质与惰性液体有大小不同的溶解度。如果被吸附的物质是气体,发生“吸收”现象。如果被吸附的物质是液体,发生“萃取”现象。分离系数取数聚决于分配系数的大小。常用的操作法有:(1)迎头分离法,当溶液连续通入吸附固定床时,溶液中诸组分因吸附能力大小不同,可顺序地由固定床另一端排出;(2)冲洗分离法,在送入溶液的同时,通入不被吸附的载体,可顺序地被吸附和解吸,然后以一定的间隔隔离开;(3)顶替分离法,在载气中加入吸附能力最强的组分,使依次顶替被吸附的诸组分。色谱分离除已在分析技术中广泛应用外,也已在化工、冶金和环保等领域中加以利用。
色谱的分离原理都是利用待测物质在流动相和固定相两相间的分配系数的不同而实现分离.
对于气液色谱来说,分离原理是利用不同物质在流动相以及固定液中的分配系数(溶解度)不同而实现分离;当流动相流动时,流动相是溶解性相近的惰性气体,而固定相的溶解性随固定液的不同而不同,所以分配系数主要决定于固定液的性质。
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色谱法的基本原理:利用样品混合物中各组分理利用样品混合物中各组分理、化性质的差异,各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。当两相相对运动时,各组分在两相中反复多次重新分配,结果使混合物得到分离。 两相中,固定不动的一相称固定相;移动的一相称流动相。 分类: 根据两相的物态类型,有液-固色谱和液-液色谱两类基本色谱方法。 液-固色谱的固定相是粉末状或颗粒状固体,具有表面吸附活性,流动相是液体。混合物中各组分在固定相表面上的吸附强度不同,当流动相流过时各组分随流动相的移动速度不同而实现分离。柱色谱、薄层色谱大都属于这类色谱。 液-液色谱的固定相是附着于载体的液层,流动相是另一种液体。混合物中各组分在两液相间的分配系数不同,则在两液相中的浓度不同,随流动相移动的速度也不同,从而实现分离。纸色谱和有些薄层色谱属于这类色谱。 一、液-固色谱原理 液-固色谱是基于吸附和溶解性质的分离技术,柱色谱属于液-固吸附色谱。 当混合物溶液加在固定相上,固体表面借各种分子间力(包括范德华力和氢键)作用于混合物中各组分,以不同的作用强度被吸附在固体表面。 柱色谱分离原理 放大浏览 由于吸附剂对各组分的吸附能力不同,当流动相流过固体表面时,混合物各组分在液-固两相间分配。吸附牢固的组分在流动相分配少,吸附弱的组分在流动相分配多。流动相流过时各组分会以不同的速率向下移动,吸附弱的组分以较快的速率向下
色谱分离法;chromatographic separation在工业上应用色谱分析原理分离性质近似组分的方法。
使溶液分批通过垂直的填充吸附剂固定床,将各种组分分离精制。色谱柱内的填充吸附剂是多孔的惰性固体,用非挥发性的惰性液体涂渍。
被分离溶液的溶质与惰性液体有大小不同的溶解度。如果被吸附的物质是气体,发生“吸收”现象。
如果被吸附的物质是液体,发生“萃取”现象。分离系数取数聚决于分配系数的大小。
常用的操作法有:(1)迎头分离法,当溶液连续通入吸附固定床时,溶液中诸组分因吸附能力大小不同,可顺序地由固定床另一端排出;(2)冲洗分离法,在送入溶液的同时,通入不被吸附的载体,可顺序地被吸附和解吸,然后以一定的间隔隔离开;(3)顶替分离法,在载气中加入吸附能力最强的组分,使依次顶替被吸附的诸组分。色谱分离除已在分析技术中广泛应用外,也已在化工、冶金和环保等领域中加以利用。
色谱的分离原理都是利用待测物质在流动相和固定相两相间的分配系数的不同而实现分离.对于气液色谱来说,分离原理是利用不同物质在流动相以及固定液中的分配系数(溶解度)不同而实现分离;当流动相流动时,流动相是溶解性相近的惰性气体,而固定相的溶解性随固定液的不同而不同,所以分配系数主要决定于固定液的性质。
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