微生物显微观察时制片方法(怎么制作微生物的制片,然后用显微镜观察)

1.怎么制作微生物的制片,然后用显微镜观察

(1) 以油性签字笔在载玻片之背面画个圈 并写上所要鉴定之细菌的名称。

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(2) 在圆圈正面滴上一滴水，水滴越小滴越好，如有需要，可将多馀的水

擦去。

(3) 用牙签沾取一点菌落涂于载玻片正面的圆圈中（勿沾取太多的细菌）。

(4) 待涂布的菌液完全风乾后（切记不可用火烧乾，以免破坏细菌细胞壁的

结构），让载玻片在火上來回數次，使细菌固定（每次通过火焰后均需

稍冷却，载玻片之温度以不烫手为原则）。

一）正置显微镜

1、安放

右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳，要选择临窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧，距离桌边3~4厘米处。

2、清洁

检查显微镜是否有毛病，是否清洁，镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要用擦镜纸擦拭，如有胶或粘污，可用少量二甲苯清洁之。

3、对光

镜筒升至距载物台1~2厘米处，低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜，光线强时用平面镜，光线弱时用凹面镜，反光镜要用双手转动。

若使用的为带有光源的显微镜，可省去次步骤，但需要调节光亮度的旋钮。

4、安装标本

将玻片放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上。用弹簧夹将玻片固定，转动平台移动器的旋钮，使要观察的材料对准通光孔中央。

5、调焦

调焦时，先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒，并从侧面仔细观察，直到物镜贴近玻片标本，然后左眼自目镜观察，左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本物像时停止，再用细调焦旋钮回调清晰。

操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时，应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值。

若使用双筒显微镜，如观察者双眼视度有差异，可靠视度调节圈调节。另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距。

6、观察

若使用单筒显微镜，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。

镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。

光强的调节：一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。除调节反光镜或光源灯以外，虹彩光圈的调节也十分重要。

(1)低倍镜观察

观察任何标本时，都必须先使用低倍镜，因为其视野大，易发现目标和确定要观察的部位。

(2)高倍镜观察

从低倍镜转至高倍时，只需略微调动细调焦旋钮，即可使物像清晰。

使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮，否则易压碎盖玻片并损伤镜头。

转动物镜转换器时，不可用手指直接推转物镜，这样容易使物镜的光轴发生偏斜，转换器螺纹受力不均匀而破坏，最后导致转换器就会报废。

(3)油镜的观察

先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后，再换油镜观察。油镜观察前，应将显微镜亮度调整至最亮，光圈完全打开。

使用油镜时，先在盖玻片上滴加一滴香柏油（镜油），然后降低镜筒并从侧面仔细观察，直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本，然后用目镜观察，并用细调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。

香柏油滴加要适量。油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。

7、结束操作

观察完毕，移去样品，扭转转换器，使镜头V字型偏于两旁，反光镜要竖立，降下镜筒，擦抹干净，并套上镜套。

若使用的是带有光源的显微镜，需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗，再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯

2.叙述细菌,放线菌,酵母菌,霉菌的光学显微镜制片方法

一、细菌制片及简单染色：

1、涂片

取洁净的载玻片1张，将其在火焰上微微加热，除去上面的油脂，冷却，在中央部位滴加一滴无菌水，用接种环在火焰旁从培养基上挑取少量菌体与水混合。用接种环将菌体涂成直径约1cm的均匀薄层。注意，取菌量不宜过大，一面造成军体重叠。

2、干燥

放在桌面上，待其自然干燥。

3、固定

将已干燥的涂片标本向上，在火焰上通过3-4次固定。其目的是杀死细菌；使菌体蛋白质凝固，菌体牢固粘附于载玻片上，染色时不被染液或水冲掉；增加菌体对染料的结合力，使图片易着色。

4、染色

在涂片上滴加染料1-2滴，使其布满涂菌部分，染色1分钟。

5、冲洗

斜置玻片，倾去染液。用水轻轻冲去染液，至流水变清。注意水流不能直接冲洗涂菌处，以免将涂菌冲洗掉。

6、吸干

用吸水纸轻轻吸去玻片上的水分，干燥后镜检。

二、酵母菌制片及简单染色。

水—碘液浸片法。将革兰氏染色用碘液用水稀释4倍后，滴加一滴于载破片中央，无菌操

作取少许菌体置于染色中混匀，盖上破片后镜剑。

三、放线菌制片方法（插片法）

1、在马铃薯浸汁琼脂培养基平板上，划线接入少量放线菌的孢子，在接种线旁倾斜地插入无菌盖玻片，于28-30℃培养。

2、培养3~4天后，菌丝沿着盖玻片向上生长，待菌丝长好后，取出盖玻片放在干净的载玻片上，置于显微镜下观察。

四、霉菌制片法

水浸制片法：

1、在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水。

2、用解剖针从生长有霉菌的斜面挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，用50%的乙醇浸润，再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下，然后放入载玻片上的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来。（也可省略酒精和水浸润，洗涤）

3、注意取菌时，毛霉和根霉用解剖针挑取少量菌丝即可，青霉和黑曲霉和培养基结合紧密，不易挑取，可连培养基一起挑取，再在染液中分离菌丝。青霉和曲霉的培养时间不宜过长，一般为2-2.5天，以免菌丝与培养基不好剥离。

4、盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片）。（黑曲霉不易观察到足细胞）

5、镜检：先用低倍镜，必要时转换高倍镜镜检并记录观察结果。

3.观察微生物时使用显微镜的正确步骤

一、安放 1.右手握住镜臂，左手托住镜座。

2.把显微镜放在实验台上，略偏左（显微镜放在距实验台边缘7厘米左右处）。安装好目镜和物镜。

二、对光 3.转动转换器，使低倍物镜对准通光孔（物镜的前端与载物台要保持2厘 米的距离）。 4.把一个较大的光圈对准通光孔。

左眼注视目镜内（右眼睁开，同时画图）。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。

通过目镜，可以看到白亮的视野。 三、观察 5.把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。

6.转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（眼睛看着物镜，以免物镜碰到玻片标本）。 7.左眼向目镜内看，同时逆时针转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。

再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 四、清洁收镜 把显微镜的外表擦拭干净。

转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。

ok了吧。

4.用显微镜观察细菌的步骤

一、用脏手上的细菌制装片：

1、收集手上细菌，用少量无菌水（可用冷开水代替）冲洗脏手，让洗手的水流到培养皿中。这些脏水就是细菌培养液。

2、制取细菌装片，取甲、乙两块洁净的载玻片，分别在两玻片的中央各滴一小滴细菌培养液；然后在甲片上盖好盖玻片后直接用600倍的显微镜观察。

（用稍偏暗的视野，调节到位可以看到多种细菌和其它微生物。很容易看到活动的微生物，这样对儿童更有吸引力和教育意义。）如果你想进一步放大并会操作，选定观察的物象后，可把此物象移到视野正中央，再转换更高倍数的镜头观察即可。

3、在乙片的细菌培养液滴上滴一小滴龙胆紫染色液，用牙签将细菌培养液和龙胆紫液搅匀、并将液滴推开，再用酒精灯加热液滴（约5秒钟）后让它自然晾干（约5分钟）。

再用600倍的显微镜直接观察，既可以看到染成深蓝色的多种细菌和其它微生物。不过此时看到的微生物都已死亡、并被固定，因此看不到它们的活动状态。

二、制取洗手后的对照装片。

1、洗手-----将手用香皂洗干净，用洁净的干毛巾揩干手；

2、收集细菌培养液-------用少量无菌水冲洗双手，让洗手液流入洁净的培养皿中；

3、制细菌装片-----制片过程与以上装片过程相同，参照制片即可。

扩展资料：

细菌的基本形态与大小

(1)球菌：

球菌是外形呈圆球形或椭圆形的细菌，直径0.5~1微米，有以下几种类型：

①单球菌：单独存在，如尿素小球菌；②双球菌：如肺炎双球菌；

③链球菌：如乳酸链球菌；④四联球菌：形成的4个细胞排列在一起，成田字，如四联球菌；

⑤八叠球菌：如尿素生孢八叠球菌；⑥葡萄球菌：如金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）。

(2)杆菌：

外形为杆状的细菌称杆菌，常有长宽接近的短杆或球杆状菌，如甲烷短杆菌属（Methano—brevibacter）;

长宽相差较大的棒杆状或长杆状菌，如枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）、梭状杆菌（Bacteriumfusiformis）;

分枝状或叉状菌，如双歧杆菌属（Bifidobacterium）；竹节状（两端平截），如炭疽芽孢杆菌（Bacillusanthracis）等。

按杆菌细胞的排列方式不同则有成对的双杆菌、呈链状的链杆菌，另外，常有栅状、“八”字状以及由鞘衣包裹在一起的丝状等多种。典型的杆菌有大肠杆菌、枯草杆菌、链杆菌、变形杆菌[2]。

(3)螺旋状：

螺旋状的细菌称螺旋菌，一般长5~50微米，宽0.5~5微米，根据菌体的弯曲可分为：

①弧菌（Vibrio）：螺旋不足一环者呈香蕉状或逗点状，如霍乱弧菌（Vibriocholerae）；②螺菌（Spirillum）：满2~6环的小型、坚硬的螺旋状细菌，如小螺菌（Spirillumminor）;

③螺旋体（Spirochaeta）：旋转周数多（通常超过6环）、体长而柔软的螺旋状细菌，如梅毒螺旋体（TreponemaPallidum）。

参考资料来源：百度百科-细菌

5.制作细菌标本片是由哪几个步骤

制作微生物玻片标本通常采用涂片法，微生物包括细菌和真菌（或包括病毒），细菌个体小，通常用涂片法制作玻片标本。涂片法是装片法制作玻片标本的一种方法。制作方法是，细菌可以用细菌液直接涂布在载玻片上，盖上盖片直接观察或干燥后染色观察，染色观察通常需要洗去染色液后观察。制作真菌标本可以采用涂片法、撕片法、贴片法和切片法，单细胞或孢子或菌丝采用涂片法，大型真菌有较大的组织块，可以采用撕片法（如撕取一部分蘑菇丝）、贴片法（将蘑菇的菌褶贴到载片上）和切片法（切片的方式观察蘑菇的结构）。

制作植物玻片标本方法很多，根据材料不同和观察目的不同采用不同方法。涂片法（观察果实营养组织，如西瓜瓤）、撕片法（观察洋葱表皮、观察导管）、切片法（观察组织、器官结构）、磨片法（坚硬的果核磨成薄片观察）。

切片法分为徒手切片、冰冻切片和石蜡切片等方法。

6.生物显微镜的几种观察方法都有什么作用

一.相差镜检法（Phasecontrast） 在光学显微镜的发展过程中，相差镜检术的发明成功，是近代显微镜技术中的重要成就.我们知道，人眼只能区分光波的波长（颜色）和振幅（亮度），对于无色通明的生物标本，当光线通过时，波长和振幅变化不大，在明场观察时很难观察到标本. 相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检，也就是有效地利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，即使是无色透明的物质也可成为清晰可见.这大大便利了活体细胞的观察，因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜. 相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见.光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减下，提高反差.在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处： 1.环形光阑（annulardiaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上. 2.相位板（annularphaseplate）在物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ.分为两种： 1.A+相板：将直射光推迟1/4λ，两组光波合轴后光波相加，振幅加大，标本结构比周围介质更加变亮，形成亮反差（或称负反差）. 2.B+相板：将衍射光推迟1/4λ，两组光线合轴后光波相减，振幅变小，形成暗反差（或称正反差），结构比周围介质更加变暗 二.暗视野观察（Darkfield） 暗视野实际是暗场照明发.它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线.因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的象. 暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的.若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见. m..m暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜.它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象.暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004 三.明视野观察（Brightfield） 明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式，广泛应用于病理、检验，用于观察被染色的切片，所有显微镜均能完成此功能. 四.偏光显微镜（Polarizingmicroscope） 偏光显微镜的特点 偏光显微镜是鉴定物质细微结构光学性质的一种显微镜.凡具有双折射的物质，在偏光显微镜下就能分辨的清楚，当然这些物质也可用染色发来进行观察，但有些则不可能，而必须利用偏光显微镜. 偏光显微镜的特点，就是将普通改变为偏光进行镜检的方法，以鉴别某一物质是单折射（各向同行）或双折射性（各向异性）. 双折射性是晶体的基本特性.因此，偏光显微镜被广泛地应用在矿物，化学等领域.在生物学和植物学也有应用. 五.微分干涉称镜检术（） 微分干涉镜检术出现于60年代，它不仅能观察无色透明的物体，而且图象呈现出浮雕壮的立体感，并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点，观察效果更为逼真. 原理； 微分干涉称镜检术是利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束.分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等，光束分别在距离很近的两点上通过被检物体，在相位上略有差别.由于两光束的裂距极小，而不出现重影现象，使图象呈现出立体的三维感觉. DIC显微镜的物理原理完全不同于相差显微镜，技术设计要复杂得多.DIC利用的是偏振光，有四个特殊的光学组件：偏振器（polarizer）、DIC棱镜、DIC滑行器和检偏器（analyzer）.偏振器直接装在聚光系统的前面，使光线发生线性偏振.在聚光器中则安装了偌玛斯斯棱镜，即DIC棱镜，此棱镜可将一束光分解成偏振方向不同的两束光（x和y），二者成一小夹角.聚光器将两束光调整成与显微镜光轴平行的方向.最初两束光相位一致，在穿过标本相邻的区域后，由于标本的厚度和折射率不同，引起了两束光发生了光程差.在物镜的后焦面处安装了第二个偌玛斯斯棱镜，即DIC滑行器，它把两束光波合并成一束. 这时两束光。