饲料抗生素检测方法(目前抗生素的含量测定多用什么方法)

1.目前抗生素的含量测定多用什么方法

牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法 随着奶牛饲养业的发展，抗生素在预防和治疗奶牛疾病方面得到广泛的应用。

生鲜牛奶中抗生素的来源主要是：第一，治疗泌乳期病牛时使用的抗生素会从奶牛体内移行到乳腺残留进入牛奶中，资料表明治疗后的奶牛，其挤出的牛奶5天内都有抗生素残留；其二，为了预防奶牛疾病并提高产量，在奶牛饲料中添加抗生素也会造成牛奶中抗生素的残留；第三，由于牧场管理不善，挤奶、储奶没有严格的卫生制度和配套的设施，人为添加或造成牛奶抗生素的污染。牛奶中含有抗生素，不仅对人的健康造成很大的危害，而且对乳品加工企业带来经济损失（因无法生成酸奶和奶酪）。

因此必须严格控制牛奶中抗生素残留，除了要做好科学饲养、精心管理；正确挤奶和预防疾病外，还要规范抗生素的使用，按国标中有关规定，用药后的奶牛5天后所产的牛奶才可作为原料乳，并且要检测其残留。世界粮农组织（FAO）、世界卫生组织（WHO）、欧盟（EC）及美国的食品和药品管理局（FDA）等对食品中抗生素最大残留量都有明确的规定，我国也有鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB4689.27—94）。

目前，鲜奶中抗生素残留的检测方法大致分为三类：生物测定法（微生物测定法、放射受体测定法）、免疫法（放射免疫法、荧光免疫法、酶联免疫法）、理化分析法（波谱法、色谱及联用技术）。下面介绍几种常用的牛奶中抗生素残留检测方法。

TTC法TTC法是我国鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB4689.27—94）的检测法，属生物检测法。其测定原理基于抗生素对微生物的抑制作用。

如果牛奶中含有抗生素，则加入菌种（嗜热链球菌）经培育2.5~3小时后，加入TTC指示剂（三苯基四氮唑）不发生还原反应，所以样品呈无色状态；如果牛奶中不含抗生素，则样品呈红色.这样实验后样品颜色不变的为阳性，样品染成红色的为阴性。TTC法的具体操作步骤：1.菌液制备：将单菌种（嗜热链球菌）以脱脂乳为培养基，在36±1℃培养箱中培养15小时后，再以脱脂乳以至于1:1稀释待用；2.取待检样液9mL，在80℃水浴加热5分钟后冷却到37℃以下，加活菌液1mL，在36℃±1℃水浴2小时，加入4%的TTC指示剂0.3mL, 36℃±1℃水浴培养30分钟；3.若样液颜色不变为阳性，呈红色为阴性；若阳性的样液，再置于水浴中培养30分钟，不显色的为阳性，呈红色为阴性.TTC法测定各种抗生素的灵敏度为：青霉素：4ppb，链霉素：500ppb，庆大霉素：400ppb，卡那霉素：5000ppb.它具有费用低，易开展的优点；缺点是耗时长，要求操作人员需有一定专业知识且实验过程中菌液的制备、水浴过程控制都要求严格遵守操作规程，否则易出现假阳性，以致出现检验结果的不稳定性。

Delvotest? sp法（戴尔沃检测法）该法最早在香港传到广东的，其使用是基于20世纪80年代初香港要求广东出口的生奶必须“无抗”且要求采用Delvotest法检测。该方法也是生物测定法，其试剂是由荷兰DSM公司生产并由AOAC认证。

原理是利用微生物—嗜热芽胞菌在64℃条件下培养2.5~3小时后会产酸，酸引起指示剂BCP（溴甲酚紫）变为黄色；若牛奶样品中不含抗生素，培养后样品呈黄色，如样品中含有抗生素， 嗜热芽胞菌生长受到抑制而无法产酸，指示剂将不变色.Delvotest? sp 法的操作步骤：1.以无菌操作将一片营养药片夹放入小试管内；2.用微量移液管将0.1mL牛奶样品注入小试管内；3.把小试管放入已预热至64℃的水浴箱或恒温器中培养；4）.定时3小时取出观察颜色变化.如果底部2/3的固体介质是黄色，则为阴性， 如果底部2/3的固体介质是紫色，则为阳性.Delvotest? sp 法具有广谱性，可检测到？-内酰胺类抗生素在内的更多抗生素，如磺胺类、四环素类、大环内酯类、氨基糖苷类、氯霉素等，其中对青霉素和磺胺类抗生素特别灵敏. 其灵敏度为：青霉素：3ppb，链霉素：300ppb，庆大霉素：400ppb，卡那霉素：2500ppb。Delvotest? sp 法集操作方便，严格实用，容易判断，结果可靠，费用适中等优点；但也易出现假阳性，实验证明：当牛奶样品中添加微生物防腐剂（如乳酸链球菌素—Nisn）或样品中有足够的洗涤剂残留时，便可影响嗜热芽胞菌生长而使实验为阳性。

Snap？法该方法是酶联免疫法，由美国IDEXX公司生产其检测分析仪及其试剂盒，均获得AOAC认证，它利用了竟争酶联免疫技术。其基本原理是用特异性抗体将固相载体激活，加入含待测抗原的溶液和一定量的酶标记抗原在45℃±5℃共同保温，使样品内的抗生素与内置抗生素标志物竟争与固定的抗体结合，然后进行洗涤和显色，内置抗生素标志物与固定的抗体结合形成的复合体，通过酶的作用分解可形成有色物质，通过测定色度并与参照物对照，就可以确定结果是阳性或阴性。

Snap？法操作步骤：1.加入乳样于样品管中，摇匀，加热样品和检测板5分钟；2.加入乳样于样品孔中，当激活圆环开始退却时，按Snap键；3.反应4分钟，由Snap？读数仪读取并打印结果.检测读数小于1.05时判为阴性，大于1.05时判为阳性.Snap？法是一种将酶化学反应的敏感性和抗原抗体免疫反应的特异性相结合的方法，其敏。

2.饲料的检测项目有哪些

饲料检测项目一览表 常规检测项目氨基酸检测□ 粗蛋白 □ 18种水解蛋白质氨基酸的测定□ 粗脂肪 维生素检测项目□ 粗纤维 □ 维生素A□ 水分 □ 维生素E□ 钙 □ 维生素D3□ 总磷 □ 维生素B1□ 粗灰分 □ 维生素B2□ 水溶性氯化物 □ 总抗坏血酸 □ 胃蛋白酶消化率 □ 维生素B6□ 热量 □ 维生素B12微量元素检测项目□ 烟酸 □ 钾 □ 泛酸 □ 钠 □ 叶酸 □ 钙 □ d-生物素 □ 镁 □ 铜 实验动物 配合饲料检测项目□ 铁 □ 常规营养成分的测定 □ 锰 □ 氨基酸的测定 □ 锌 □ 维生素的测定 □ 硒 □ 矿物质和微量元素的测定。

3.猪饲料国家允许添加的抗生素有哪些

多肽类抗生素如：硫酸粘杆菌素 恩拉霉素 维吉尼霉素 阿伏霉素 硫肽菌素 。

大环内酯类抗生素如： 泰乐菌素 北里霉素 螺旋霉素 红霉素 竹桃霉素。

聚醚类抗生素如：拉沙洛西钠 莫能霉素 盐霉素钠。

四环素类抗生素：如土霉素 金霉素。

合成抗生素及其相关药物： 胂制剂 铜制剂 锌制剂 喹乙醇 卡巴氧 痢特灵 磺胺药

多糖类抗生素：黄霉素

其它几种抗生素促生长剂：阿布拉霉素 卑霉素 杆菌肽锌

4.根据检测原理不同,食品中抗生素残留的检测方法可分为哪几种

目前应用于食品中抗生素残留的检测方法依据检测原理的不同主要有：微生物检测法、理化检测法和免疫分析法。

1、微生物检测法

抗生素对微生物机能和代谢具有抑制作用，利用该性质可实现对样品中抗生素残留的定性或定量分析，而且检测费用较低，但是花费时间长、特异性差、灵敏度低、对微量残留检测易产生误差。

2、理化检测法

理化检测法是一种根据抗生素的分子理化性质对其进行分离和检测的方法，如色谱法（高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等）、电泳法（毛细管电泳法等），这种方法检测灵敏度较高、结果稳定、重复性好、精确可靠，是目前食品中抗生素残留测定的确证检测方法，但是为了减少背景干扰样品前处理方法复杂，分析速度慢，分析仪器昂贵，需要专业的操作人员等缺点限制了该方法的普遍推广应用。

3、免疫分析法

免疫分析法是以抗原与抗体的特异性结合为基础的分析技术，虽然成本较其他方法高，但是具有操作简单、取样量少、前处理简单、检测快速、特异性强、灵敏度高、可同时检测样品中多种抗生素残留、可实现大规模的检测及容易推广普及等优点，是一种理想的抗生素残留的检测方法。其中，基于量子点（quantum qots,QDs）的荧光免疫分析方法应用更为广泛。QDs作为荧光标记相对于传统荧光染料有如下优点：荧光强度高，抗光漂白性能好，斯托克斯位移较大，可通过控制粒径改变荧光发射波长，能够实现“一元激发多元发射”等。这些优势使得QDs在荧光标记中的应用日益广泛。用QDs对抗体进行标记，通过抗原直接包被法或间接竞争法两种免疫方法实现食品中抗生素残留的检测。Ding Shuangyang等，直接获得商品化的QD655-羊抗鼠IgG，然后通过羊抗鼠IgG与抗体的作用得到QDs-抗体探针，分别实现了对磺胺二甲嘧啶和恩诺沙星在鸡肉组织中的检测。除此之外，由于QDs的能够实现“一元激发多元发射”的荧光特性，还可以用于多种抗生素的同时检测。Peng Chifang等采用五种不同发射波长的QDs分别标记五种不同的抗体，通过间接竞争荧光免疫分析法（ic-FLISA）实现了同一样品中五种抗生素残留的同时检测。Zhu Kui等[7]用两种发射波长的QDs，通过直接竞争（QDs标记一抗）和间接竞争（QDs-二抗-一抗或QDs-亲和素-生物素-一抗）两种方法实现对磺胺类和喹诺酮类抗生素在牛奶中残留的检测，并在同一牛奶样品中与酶联免疫分析（ELISA）联用，用辣根过氧化物酶（HRP）标记，实现三聚氰胺的同时检测（HRP-二抗-一抗）。采用以量子点为标记的荧光免疫法检测食品中的抗生素残留是一种高效、准确、简单、快速的检测方法。

5.饲料厂如何鉴别各种药物的品质,抗菌能力

药敏试验的建议实在是离谱了。

很多学校都没有条件做，不说设备，就是定型的菌种你都找不全。 那只是帮助分析某种药物，对指定细菌的作用。

实际的生产，只要抗生素用上能杀菌，成本合适，无不良副作用就好了呀。 一般而言，哪怕是美国的usp和欧洲的ep标准，包括我们国家的药典。

对于药物的评价除了一般的指标（失水重、灼烧残渣、重金属等） 对于含量主要两个方法： 1 HPLC，这个不需要说了，比较常见的方法，只要有标准品，掌握操作方法，应该还好的。 2 生测法，用药典规定的菌种检验药物的抗菌力，得到的是“效价”，一般是日本人发现得抗生素用的比较多。

硫酸粘杆菌素、硫酸新霉素等等~~~ 我们和客户的交流中，很多客户只认HPLC也很让人郁闷。毕竟，个人觉得，生测法是反映实际效果的。

即便药典不是很完美，可如果药典的方法都被否定了，真的不知道还有什么标准可以参考。 另外，很多朋友质疑国内的抗生素厂家。

这点完全可以放心，目前大家能用到的抗生素，都是可以国产化的。 中国的仿造能力可是世界一流，这个你不承认？ 但凡中国能生产的，基本国外公司全挂掉。

这个你也承认吧？ 建议大家选择知名大厂，比如升华拜克。 知名的抗生素大厂，都是出口世界各地的，经过世界最严格的质量体系约束，也备受世界大公司审查。

他们的质量是完全可以放心的。