中药研制的方法(中药药理研究的具体方法)

1.中药药理研究的具体方法

1 血清药理学方法学研究 在中药药理学研究中，有相当一部分药理活性实验和作用机理是在体外进行的，而利用中药粗提物直接进行体外实验，其结果的真实性和可靠性都受到很大影响。

中药血清药理学研究方法是指给动物经口用药后一定的时间采血，取含药血清进行体外实验的一种研究方法，该方法由日本学者田代真一提出，95年前后国内即陆续开展。国家自然科学基金委员会曾于1996年资助重点项目：中药复方体外实验的方法学研究，在含药血清药理作用强度与体内给药的量效关系研究、给药方案研究、反应体系中含药物血清加入量的确定、采血时间的确定及时效关系研究、含药血清低温保存和血清灭活对效应的影响等方面做了大量卓有成效的工作。

在以含头风饮（川芎、天麻为主）药物血清抗血小板释放5-HT和阻滞内皮细胞钙通 道作用为指标的实验中证实：在一定范围内，动物给药量与吸收入血的药物量及含药血清的体外药理效应呈正相关〔1〕；含药血清的药物浓度除与给药剂量有关外，还与给药方案 （如一日内给药次数及给药天数等）直接相关〔2〕；体外实验体系中含药血清加入量 的多少对药理效应产生明显的影响，因而对最佳反应体系的探索具有重要意义〔3〕 ；在采用血清药理学方法进行实验前，进行时效关系研究，找出给药后最佳采血时间是十分 必要的〔4〕；含药血清低温保存和血清灭活可能对药理效应产生明显影响，应以使 用新鲜血清或保存时间较短的血清 为宜〔 5〕。鉴于目前多数中药或复方有效成分尚不明确，成为制约中药现代研究的瓶颈，近年 进行了中药血清药化学与血清药理学协同研究的尝试，以揭示产生药效的物质基础。

提出在 建立血清化学成分指纹图谱并测定相应含药血清药理效应强度后，进行药物效应成分分析， 如果含药血清的药理效应强度与其血清指纹图谱中某成分指纹峰大小相一致，则说明该成分 与所观察药理作用密切相关〔6〕。中药血清药理学针对中药及其复方复杂多样的化 学成分的特点，结合化学、微生物学、分子生物学等多学科的先进技术手段，将有可能成为 中药药理学研究的一种新的方法体系。

2 单味药药理研究 常用单味中药药理研究是中药药理研究的重要内容。近年仍以对整体动物 药理效应观察及对器官、组织、细胞的影响等为主，现代生物技术如分子生物学研究方法 也受到广泛关注和应用。

研究的药味相对集中，以补益药、活血化瘀药居多，不少常用中药 的新药理作用机理被揭示。 研究发现黄芪对自然衰老大鼠脑皮质、海马、纹状体3个脑区降低的M胆碱受体和M1亚型受体密度有显著的上调作用，并可调节老年大鼠血浆环核苷酸含量〔7〕；衰老大鼠心肌 β受体密度及T3、T4、皮质醇含量均降低，黄芪、人参、枸杞子可 升高之〔8,9〕；对肝硬化大鼠存在的下丘脑血管加压素系统异常有改善作用 〔10〕；可以明显提高肾病综合征大鼠血浆白蛋白水平，改善肾小球滤过率和尿钠排泄 〔11〕；对环磷酰胺所致免疫功能抑制小鼠细胞毒活性有显著增强作用，并可能 通过调控巨噬细胞C1q的分泌功能来增强免疫和抗肿瘤作用〔12,13〕；还发现 黄芪煎剂及含黄芪小鼠血清均对小鼠脾淋巴细胞增殖、混合淋巴细胞培养反应及IL-2的产生有促进作用〔14〕。

冬虫夏草水提液能降低正常心肌细胞内Ca2+ 的浓度，减轻缺氧再给氧时细胞内Ca2+超载现象，并明显减轻缺氧再给氧时细胞 内脂质过氧化〔15,16〕。红参在预防高血压性视网膜动 脉硬化起重要作用，能使内皮细胞膜的光整性、细胞器的结构及内皮细胞分泌各种血管舒缩 物质保持正常，抑制平滑肌细胞的异常增生，还有扩张血管、减少外周阻力及调节血压的作 用〔17〕。

生地黄可明显抑制皮质酮致“阴虚”模型小鼠巨噬细胞Ia抗原 的高水平表达，降低其提呈抗原能力，从而表现出一定的免疫抑制作用〔18〕。丹参注射液可明显降低缺血再灌注引起的大鼠脑水肿，减少脑皮层及海马组织丙二醛含量，提高过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性和还原型谷胱甘肽、三磷酸腺苷的含量〔19〕。

3 有效部位、有效单体药理研究 随着中药化学成分提取、分离技术的进步，中药药理学与中药化学学科结合更为密切， 中药 有效部位、有效单体的药理研究日益增多。近年研究涉及的有效部位和有效单体有数十种， 研究较多、较深入的有人参皂甙、雷公藤多甙、三七皂甙、淫羊藿总黄酮、川芎嗪、天花粉 蛋白、牛膝多糖、地黄多糖等。

有效部位、有效单体药理作用的深入研究，有助于揭示中药 治疗疾病的机理。研究发现，人参皂甙对辐射引起的细胞膜损伤有防护作用〔20〕 ；人参二醇皂甙对心肌缺血再灌注犬心脏功能具有保护作用〔21〕；人参根总皂甙 具有明显抗DNA损伤及抗突变效应〔22〕；人参皂甙Rb1对应激性性行为低下有保护 作用，其机制可能与抑制应激动物血浆皮质酮升高和提高睾酮水平有关〔23〕。

雷 公藤多甙具有抗炎和免疫抑制作用，能显著降低人工晶体表面、虹膜和睫状体的炎症反应 〔24,25〕；对哮喘豚鼠肺组织的磷脂酶A2有明显抑制作用 〔26〕。三七总皂甙显著提高心肌细胞内肌浆网膜钙泵活性，减少心肌细胞Ca2 +〔27〕，对犬心肌缺。

2.中药是怎样制造的

你指的是中药饮片还是中成药呢？它们都可以称为中药的，中药饮片多数是植物药经采摘后净化，除去泥土杂质，根据不同要求切片，切断或切丝，干燥后使用，或应用不同的炮制方法炒等制作而成的。

中成药制剂用不同的萃取方法比如渗漉法，回流法等方法提取药物的有效成分，去除杂质，根据制剂的不同，加入不同的添加剂，例如制成颗粒剂，需将提取的药液经过专业机器雾化，喷出的药雾经快速干燥成型变成小颗粒，也有一种机器将干燥的药物切削称小颗粒，如制成片剂则是在提取药物有效成分后按照规定的制剂标准加入淀粉，糊精等辅料，经机器压制成统一规格的片剂。

3.中药的分类方法有哪些

中草药的种类很多，根据近年的初步统计，总数约在八千种左右，常用中草药亦有700种左右。如此繁多的种类必须按照一定的系统，分门别类，才便于习、研究和应用。药物分类的方法是根据人们对于药物认识的逐渐深化而不断发展的。例如我国最早的药书——《神农本草经》把当时常用的365种药物按照毒性强弱和用药目的不同分成上、中、下三品：上品是延年益寿药，无毒，多服久服不伤人，中品是防病补虚药，有毒无毒，根据用量用法而定；下品是治病愈疾的药物，多有毒性，不可久服。这种分类方法简单而粗糙，其中有些药物的分类也不一定恰当。但当时，可能在避免因用错药物而中毒的问题上是起到了一定作用的。梁代陶弘景编《本草经注》时，增药365种，分为玉石、草、木、果菜、米食、有名未用六类，每类又各分上、中、下三品，这是根据药物自然属性进行分类的开端，但仍较粗糙。直到明代李时珍编《本草纲目》一书，分类方法始有重大的发展。他采用了根据以前本草的分类方法略加修改，把药物分为水、火、土、石、草、谷、菜、果、木、器、虫、鳞、介、禽、兽、人等十六部外，又把各部的药物按照其生态及性质分为六十类。例如草部分为山草、芳草、隰草、毒草、蔓草、水草、石草、苔、杂草等。而且他还往往把亲缘相近或相同科属的植物排列在一起，例如草部之四、隰草类中的53种药物中，有21种属于菊科，而且其中10种是连排在一起的。这种分类方法有助于药材原植物（或动物）的辨认与采收，对于澄清当时许多药材的混乱情况起了很大作用。现代记载中草药的科书所采用的分类方法，根据其目的与重点而有不同，主要有下列四种：

1按药物功能分类——如解毒药、清热药、气药、活血化瘀药等。

2按药用部分分类——如根类、叶类、花类、皮类等。

3按有效成分分类——如含生物碱的中草药、含挥发油的中草药、含甙类的中草药等。

4按自然属性和亲缘关系分类——先把中草药分为植物药、动物药和矿物药。动植物药材再根据其原植物原动物的亲缘关系来分类和排列次序。如麻黄科、木兰科、毛莨科等等。

上述各种分类方法各有优缺点，究竟以采用那一种分类方法比较适宜，主要取决于我们的目的和要求。例如按药物功能分类，有利于习和研究中草药的作用和用途，按药用部分分类便于习和比较各类药材的外部形态和内部构造，因而有利于药材的性状鉴定和显微鉴定；按有效成分分类有利于习和研究中草药的有效成分及其化鉴定。采用按药材自然属性和亲缘关系分类的方法，这是由于同科属的中草药在外部形态，内部构造、化成分和疗应用等方面往往有很多相似之处。采用这种分类方法不但便于习和研究这些共同点，也便于比较它们的特异点，以揭示其规律性，这样，既有利于中草药的鉴定也有利于从同科属动植物中寻找含有相同或类似成分的动植物，以扩大药物资源。

4.药品研发中的最关键的技术有哪些及其理由

药品研发主要包括化学药合成、中药及生物。其研发的关键技术各不相同，以下简单列举：

1.化药

主要是确定疾病筛选好对其有效的结构式，用各种化学反应来获得需要的结构。这需要对化学的基本知识和操作手段非常了解；关键技术就是合成工艺及制剂。

2.中药

中药的开发主要设计：

1）对中成药来说首先是对该方子进行验证，按中医君臣佐使等等配伍方面的知识进行论证，看是否符合辩证要求；

2）接下来就是一般的流程，包括提取、分离、纯化。所谓提取，也就是根据药材里面所含的，所需的有效成分，用一系列的化学手段将之提取出来，一般是萃取或者水提、酒提等，工业上一般多用酒精，因为酒精无毒且容易浓缩回收，这个时候提取出来的为粗浸膏；还要进一步的分离出较纯的成分，一般是用硅胶柱柱等进行分离；当所需的有效成分达到75%以上的含量后就可以用重结晶，或者再次过过硅胶柱获得纯度较高的成分；

3）获得单体后要进行结构鉴定；

4）制剂

添加辅料，制成胶囊、口服液、片剂等等剂型。

5）包装设计

6）申报

按国家药品注册申报要求，一般做三期临床，获得生产批件后就可以进行生产销售了。

中药关键技术就是工艺和制剂，另外有些中药成分不稳定，制剂比较困难。

3. 生物制品

这不是很清楚，但大致相似。

现在药品研发最困难的就是受政策限制，原则上功效、剂型较同类药品无明显优势的药品是不受理的，研发出药品还得跟踪政策上的调整，以免投入却没有结果。总之，药品研发风险很大，受制于技术、市场和政策，之前的调研工作一定要细致到位。药品研发其中涉及的方面非常多，如中药开发，首先还要解决起资源问题等等了。药品研发总的关键技术其实就是工艺、制剂和申报时的政策了。由于篇幅有限，设计面太广，没有特定的对象也只能简单说点。。

5.中药药丸制作的方法有哪些

以八珍丸为例党参100g白术100g茯苓100g甘草100g当归100g白芍100g川参100g熟地黄100g（一）制法1.以上八味粉碎成细粉过80目筛备用。

2.炼蜜：称取一定量的蜂蜜于蒸发皿中加热至沸（如有杂质可过滤），继续炼制成炼蜜程度，捞去漂浮的泡沫带有光泽即可。 3.合药：将已炼制好的炼蜜与药粉按比例进行混合（药粉与炼蜜的比例一般为1:1或1:5也有不足1:1的，要根据药物性质及季节不同而异。

一般含糖类、油脂类的中草药用蜜少。含纤维素较多和质地疏松的药物用蜜量多。

夏季用蜜量少，冬季用蜜量多。均匀地揉合，做成像面团样丸块（在搅拌机中机械混合或在其它容器中人工混合）。

合药时，蜂蜜一般趁热加入（如含有胶质，树脂或挥发性成分需待炼蜜稍冷后再加入混合），充分和匀，使其内外全部滋润，色泽一致，软硬适中，能随意捏塑即可。4.制条，成丸。

将合好的面团样软材放置一定时间，使药料与蜂蜜成分混合滋润，并产生一定粘性后即可搓条，搓条要粗细一致，外表光滑。 即可用手工或制丸板做成一定量的、光滑的、园球形丸粒，大量生产可用机械制丸。

制丸时，先将药团块称重，以便分计量准确，即按每次所需制成丸粒的数目与每丸的总量进行计算，按计算量称取团块再搓条，制成预计数目的丸粒，搓丸条的虚词可依丸粒大小来定，丸条搓好后再分割成小段，再搓圆成球形即可。 为避免药团粘手和粘器具，操作时可用适量的润滑剂。

润滑剂可用甘油或麻油（花生油）500g，蜂蜡95g，加热熔化而成。夏季蜂蜡可适当多加一点。

5.包装与贮藏：制成的蜜丸，可采用蜡纸、玻璃纸、塑料袋、蜡壳包好，并注明品名、批号、规格，贮存于阴凉干燥处。

6.中药药理的研究内容

中药药理学研究主要包括主要药效学研究和一般药理学研究。

中药新药主要药效学研究应遵循中医药理论，运用现代科学方法，制定具有中医药特色的试验计划，根据新药的功能主治，选用或建立与中医“证”或“病”相符或相近的动物模型和试验方法，对新药的有效性做出科学的评价。主要药效学研究包括下面几个方面。

中药药理学 （1）主要药效学研究设计依据和要求中药具有成分复杂，药理作用广泛的特点，在实验设计时应根据新药主治（病或证），参考其功能，选择能够反映其疗效本质的主要药效进行重点研究；间接证实其药效的辅助试验可酌情选作，要分清主次。如主治风湿痹证（类风湿性关节炎）的新药，应以免疫性关节肿、细胞免疫和镇痛作用为主要试验，特别是免疫性关节炎为重中之重。

如新药对二型胶原（常用不完全性佐剂代替）性关节炎的继发肿胀没有抑制作用，其他试验结果再明显也是没有用的。此外、主要药效试验应从多方面进行论证，至少应选用两种或两种以上模型加以证实，且以整体试验为主。

要求实验方法可靠、技术先进、操作规范、结果可信。（2）选择实验方法药理实验方法主要分为在体试验和体外试验两大类。

两者互相补充，可以从不同角度，不同深度研究中药新药药效。两种方法各有所长。

体外试验包括离体器官、组织、细胞、酶、受体、细胞内信息及基因等实验。其可以按要求严格控制实验条件，具有重复性好，用药量少、节省动物等优点，且可排出体内神经体液等各种复杂因素的干扰，可进行直接观察，获得准确结果。

所得结果较易分析。在1、5、7类中药新药的研制中，因含杂质较少，可以配合一定的体外试验。

但在进行体外试验时，应充分估计到中药粗制剂中杂质和理化性质对实验结果的影响，如药液的酸碱度、各种电解质和鞣质等的干扰，所得结果常常不能反映临床疗效。例如在试管内抗菌作用较强的中药，常常在体内不一定表现出强大的抗菌作用；某些中药含有大量钾离子、钙离子，其粗制剂在麦氏浴槽中表现出对离体平滑肌、心肌有明显的药理活性，但口服后不一定产生相应作用。

体内试验也称在体试验，其比较接近于临床状态，适于综合性研究，所得结果较为可信，可以直接反映临床疗效。中医药学以整体思想体系为基础，重视宏观调控。

中药具有多成分多靶点的特点，整体试验能较全面的反映药物的作用。特别是中药新药2类药材、6类复方制剂大多属粗制剂，更应强调以体内试验为主。

要证实新药具有某种药理作用必须通过体内试验证明有效。体外试验仅起辅助作用。

具体试验方法请参考相关方法学书籍。近年来开展的中药血清药理试验方法是一种新的体外试验方法，其将受试药物经口给与动物后，取其血清作为药源加入体外反应系统中研究其药理作用。

此种方法尽管目前仍存在很多问题，尚待解决，但对中药粗制剂的体外试验具有重要价值。严格说来，采用血清药理试验方法，给药方案需要进行大量的预试验，才能找出最佳给药方案。

给药方案包括给药剂量，每天给药次数，连续给药时间，给药后采血时间以及血清中所含相关活性物质的灭活条件。李氏根据近些年来所掌握中药有效成分大量药代动力学数据，提出通法如下：将受试药物每天给药两次，连续给药3天，末次给药后1小时采血；给药剂量为临床等效剂量。

按此通法方案进行，理论上中药或其复方所含80%以上的成分于给药后1小时处于达到或接近峰值。血清中活性物质对所含药物作用有干扰，如何排出干扰是一项十分复杂的问题。

一般排出酶活性及补体干扰，常采用56℃条件下放置30min，这是最简便的方法。但不能列为通法。

因为干扰因素不同，排出干扰的条件差异会很大。（3）选择动物模型和指标研究药物的作用仅仅在正常动物身上进行还不够，还需要制备各种动物病理模型，因为病理模型模拟疾病状态，比正常机体更接近病人的机能状态，有些药理作用在正常动物身上观察不到，如抗胃粘膜损伤药，抗菌、抗病毒药，抗恶性肿瘤药，解热、镇痛、抗炎药等均必须在相应的病理模型上才能观察到相应的作用。

因此，病理模型在新药研究中占有重要地位。病理模型的选择应首选符合中医临床证或病的动物模型。

如研究补虚药对免疫功能的影响，应首选免疫功能低下的虚症模型，按照中医辩证施治原则“虚则补之”，凡是正气虚衰病人，才有免疫功能低下表现，用补益药可使其免疫功能增强。进一步根据药物类型，选择相应病理模型。

如治疗脾虚症的新药，宜选用脾虚症的动物模型，治疗血虚证的新药，应选择血虚证的动物模型。但目前制造完全模拟中医病或证的病理模型尚有困难。

现有模型与临床证候相距甚远，故研究中药新药也常常采用一般化学药物所常用的病理模型，如高血压、糖尿病、中风、冠心病、肝炎、肝硬化等病理模型。观察指标应选用特异性强、敏感性高、重现性好、客观、定量或半定量的指标进行观察。

如在治疗冠心病心绞痛的中药新药进行疗效研究时，制备心肌缺血模型时，可供选择的方法很多，其中以阻断小型猪或犬冠状动脉所致的局限性心肌缺血模型与临床更为相似，较为合理，且可定位、定量、。