种子贮藏 seed preservation 种子收获后至播种前的保存过程。
要求防止发热霉变和虫蛀,保持种子生活力、纯度和净度,为农业生产提供合格的播种材料。种子生活力的主要标志是其萌发性能,一批种子的寿命指群体发芽率从收获后降到50%所经历的时间,也称“半活期”,即群体平均寿命。
发芽性能和寿命主要决定于遗传特性、种子形态结构和生理活性、种子质量和贮藏条件。以种子含水量和贮藏的温度、湿度等的影响显著。
种子含水量在贮藏期间应控制在安全含水量以下,稻、麦、玉米等粮食作物种子安全含 水量为12%~13%;棉花、豆类、花生等高油量种子为5%~9%;蔬菜种子为7%~9%。温度和湿度显著影响种子生活力,应避免高温(>30℃)和高湿(相对湿度>75%或种子含水量>15%)的贮藏条件(可参考哈林顿通则)。
气体影响种子呼吸,应保持10~20℃低温、干燥种子在密闭条件(减少含氧量)下贮藏。贮藏方法因种子用途而异。
作物品系、育种材料种子,用麻袋、多孔纸袋、玻璃瓶等包装;大田种子采用散装、围囤或袋装。种子入库前先行种子清选干燥和库房消毒;入库后注意通风换气和防潮、防虫、防鼠并定期检查和测定发芽率。
根据种子的胜利特点及贮藏的目的分为三大类,即干藏法、湿藏法和流水藏法。 此外,超干贮藏法也是比较前沿、科技含量更高的贮藏方法。
菌种保藏是食用菌产业的一项基础工作,是确保野生种质资源基因留存和现有生产用种遗传性能相对稳定的必要手段。
菌种保藏的方法多种多样,有的虽然保藏效果好,但投资高或操作繁杂。在生产实践中,更需要设备投入少,能保障菌种不死亡、不污染、最大限度地保持优良种性的简便方法,如斜面低温短期保藏和自然基质较长期保藏相结合的方法。
一般而言,对母种进行长期保存,对原种进行短期保存。须保证优良菌种的性状和活力不发生变异,不死亡,不被污染,确保其纯度。
因此,保存方法应具备取材容易、操作方便、菌种不易退化、长期保存不污染杂菌等优点。常用的菌种保存方法如下:(一)斜面低温保藏 该法的优点是保藏方便且所占空间较小。
具体做法是:菌丝长满斜面后,放在0~5℃保存。以后每隔一定时间(2~3个月)转管一次。
转管保存不能长期用PDA培养基,否则种性易退化,灰树花降解木质纤维素的能力减弱。因此隔一定时间(1年左右)须把菌种转接到木屑培养基上复壮,之后挑选健壮无污染的菌丝再转回PDA培养基保存。
在长期保存过程中,要防棉塞受潮滋生杂菌。菌种试管口最好用蜡烫封,以防培养基内水分过快蒸发。
增加琼脂用量(2.5%~3%)可减缓水分蒸发。还要防止菌种管上的标签脱落而造成种系混杂。
斜面低温保藏方法简便易行,能随时观察保藏菌株的活力和纯度,一旦染杂,肉眼能及时发现。(二)自然基质保藏 此法是根据灰树花的特性,利用自然基质保藏其菌种的方法。
灰树花是木腐菌,可以采用以木屑为主料的培养基。自然基质营养全面,且大部为缓释养分,不易产生营养过剩或饥饿;其次,培养基理化性状好,可吸收或缓冲菌丝代谢出的有害物质,水分与通气协调平衡,部分菌丝扎入基质内生长,不裸露于空气中,菌丝呼吸强度低,生命力强。
1.原料与配方 粗、细木屑比例适当,采用板栗树木屑最佳,粗木屑粒径为2毫米左右,细木屑为一般圆盘锯屑,粗、细的比例为1∶2,添加干木屑重量20%的麸皮和1%的糖,含水率为60%左右。这样的基质通气性好,营养丰富且供菌丝分解利用的时间长,长到基质内部的菌丝比包裹在基质外部暴露于空气中的菌丝耐受性强。
不同粒径的基质比例适当,还能协调气与水的矛盾。粗粒过多,架空菌丝多;细粒过多,透气性差,菌丝生长慢。
应用配方如下:栗木屑78%,麸皮20%,石膏1%,蔗糖1%,水65%配料,装入较粗大的试管中,装料量为试管的1/3~1/2,1.5千克/厘米2灭菌1.5小时。冷却后,接入需保藏的菌种,在28℃下培养,待菌丝长满木屑培养基时取出换上无菌橡皮塞,在0~5℃冰箱内保藏1~2年转管一次。
2.容器与装量 采用容量250毫升的葡萄糖玻璃瓶,清洗洁净,装量一般不超过玻璃瓶容量的3/5,填料不能过满,瓶壁所残留的颗粒须擦拭干净,否则保藏的菌种易引起污染。3.灭菌和冷藏 灭菌时若采用棉塞封口,基质表层易失水,接种成活率低,即使菌丝复活,生长也很缓慢,所以最好采用聚丙烯膜封口,接种后换用无菌棉塞培养,待菌丝长满后再换成有孔灭菌胶塞冰箱保藏。
用上述方法保藏的菌种经3年贮放后,接出成活率均达90%以上,出菇验证产量及子实体形态特征均无明显变化。因此,自然基质保藏法具有保存期长,菌种遗传性能相对稳定的特点。
(三)木粒PDA斜面保藏 灰树花在自然状态下易发生于栗树根部,这说明其营养需求较为特殊。根据灰树花这种习性,在PDA基础上添加适量的栗树木粒制成母种培养基。
在多年的使用中发现,用该培养基培养的母种生长势好,在转接原种时,适应能力强,萌发定植快;用作菌种保藏基质时,保藏时间长,并能很好保持菌种的优良性状。1.木粒PDA的制作 选取栗树边材,加工成0.3~0.5厘米的颗粒,及时烘干或晒干备用。
称取葡萄糖10克,KH2PO41克,1溶解于1升清水中配制成营养液。将营养液倒入盛有木粒的小铝锅中,营养液以完全浸没木粒为准。
煮沸10分钟,以加快木粒对营养液的吸收速度,起锅静置30分钟让木粒吸足营养液。捞出木粒,沥掉表面的水,装入试管,装量为试管长的1/6,最多不得超过试管长的1/5,否则在摆制斜面时,不易使木粒均匀分散于斜面的表面上。
选取新鲜的马铃薯,去皮并切成薄片,称取200克放入小铝锅中,加入1升清水,文火煮沸30分,趁热过滤取汁,并补足1升的体积。称取琼脂20克,葡萄糖20克,KH2PO4 2克,MgSO47H2O 2克。
先将琼脂剪碎,加入到马铃薯滤液中,继续用文火加热,使琼脂溶化。待琼脂完全溶化后,加入称好的其他3种营养成分,搅拌使这些物质溶解均匀,趁热装入已装有木粒的试管中,装至试管长的1/3处,塞上棉塞。
在0.8~1千克/厘米2蒸气压下灭菌40分,待气压降至0时,开盖取出,趁热轻轻抖拍试管,使木粒分散后即可摆制斜面,并使木粒呈半裸状分布于斜面上,待凝固后便制成了木粒PDA培养基。2.生长及保藏效果 木粒PDA斜面上培养的灰树花母种,菌丝生长迅速、良好,12天即可长满试管,但菌丝的后期生长势更为粗壮、浓密,后劲足。
转接原种时,菌种适应力强,定植快。这表明,灰树花菌丝的生长速度、生长势不仅取决于本身的遗。
有以下两种: (1) 沙藏法:选择空气流通的瓦房,在地板上铺一层15 ~ 20厘米厚的干净细沙,然后在沙层上面将新鲜的橡胶种子和细沙混合并堆至50厘米高,最后在沙堆顶部和四周盖15 ~20厘米厚的沙,并控制沙堆有一定的湿度。
此法贮藏种子3个月,发芽率仍达70% ~ 80%。 (2) 塑料袋贮藏法:新鲜种子经过杀菌剂处理后,装入聚乙烯薄膜袋中,每袋盛2 ~3千克,约占袋容量的3/4,封袋口后再用大头针在袋身上刺5 ~6个小孔,然后置于室内存放,并做好防鼠防虫(主要是蟑螂)工作。
据中国热带农业科学院的试验,此法贮藏种子7个月,仍有50%以上的发芽率。
玉米种子 有条件的农户最好是带贮存,在播种前再脱粒。用种量大的农户、场站,既可用玉米楼子贮穗,也可在住室火山
墙里边吊穗贮藏。搭楼子贮藏的必须在低温到来之前采取日晒、烘干、自然干燥等方法,把玉米穗的水分降至20%以下为宜,并
用草帘子将四周严密围好、盖严,避免严寒和风雪的侵袭。
水稻种子 水稻种子冬季贮藏主要有两种形式。一是仓房贮存,要求在11月上旬前把种子水分降至18%以下,在12下旬前把
水分降至14%,仓房温度保持平稳状态,避免忽冷忽热。二是封闭保温贮存。此方法适于含水量为14%—16¥的种子。方法有三
种。一是囤套囤贮方法:在装满稻种的囤子外面再套一圈囤子,在内外两层囤子间装30—40厘米厚的稻壳或其他粮食等密闭保
存。二是围堆贮存法:用装满其他粮食的袋子围成“墙”,把稻种装在中间,上面压上粮袋。三是地窖贮存法:一般在冻化交
替时(约10月未至11月初)种子入窖,气温0—2℃时(翌年4月初)种子出窖。
花生种子 花生种子在含水量13%时,在零下10℃条件下,发芽率开始下降;含水量低于8.5%时,才能安全越冬,所以,在
花生收获后,一定要及时晾晒风干。越冬一般采用小囤通风贮存。选择室外通风高燥处,垫起35—50厘米,铺上用树条铺成的
囤子盘,再用树条帘子围成宽1米左右的小囤子,上面苫盖严实。阴天或雪天在围子草帘,晴天要拿掉草帘,使种子通风干燥 高梁、谷子种子 高梁、谷子的种子贮存是在田间选穗割下时,一定要留30厘米左右长的秆,捆成小捆,晾干后搭挂在住房或仓库内,也可放在囤子里贮存。对已脱粒的种子必须要晾晒好,含水量达到要求的标准。数量大时可在仓内坐囤贮存,注意垫好囤衣,防止受潮。
大豆种子 大豆脱粒后,必须及时晾晒风干,一般可采用小囤通风贮存。选择室外通风高燥地方,用土垫起50厘米左右,铺
上木头,囤底铺上席子,周围也要挂上席子,装完豆种后上面要苫盖严实。
马铃薯 如果贮存不好,不仅引起种苗大批霉烂,丧失种子价值,而且也是引起马铃薯种薯退化的原因之一。贮藏马铃薯的
窖,温度必须要保持在1—3℃之间,相对湿度要保持在85%以下,并且要保持空气流通。
贮存期间要注重以下几个事项:一是要根据不作物、不同品种、不同用途的种子,分囤、分仓贮存。要放好标签,注名品
种、名称和数量。二是种子和化肥、农药决不能混放在一起,也不要放在烟、气较大的地方。三是做到经常检查,特别是在春
季要定期检查种子的温、湿度,做好发芽试验,做到心中有数,防止坏种。
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